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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » HPLC可以用来做蛋白的药代实验吗？蛋白59KD
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC可以用来做蛋白的药代实验吗？蛋白59KD

大家好，我的融合蛋白59KD，要做药代实验，已经选定了双抗体夹心ELISA来做，昨天有一个老师说我只用这一种方法不行。。。特异性不一定强，所以让我再找一种方法。

     不知道能不能用HPLC来分析血清？我看别的HPLC做药代的都是化学药物，先把血样中得蛋白质给沉淀了才进柱子的（取血后，需要加抗凝剂抗凝，然后离心得血浆
，血浆需经沉淀蛋白或者萃取后，才可以进HPLC ）

     可是我的待测物本身就是蛋白质，不知道能不能用HPLC？
     各路神仙，求求帮帮小女子吧！

[ Last edited by 阿娇阿娇 on 2012-5-18 at 09:52 ]
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1楼 2012-05-18 09:47:36
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-19 11:01:59
不知道你的蛋白要不要活性，如果要活性的话，肯定是不行的，不要活性我还不知道哦
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2楼2012-05-18 14:52:01
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-05-18 14:52:01:
不知道你的蛋白要不要活性，如果要活性的话，肯定是不行的，不要活性我还不知道哦

谢谢！  
我是把蛋白药物注射到动物体内，然后取血，测它在血中的浓度，只要能测出浓度就行
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3楼2012-05-18 15:32:25
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njgdmc

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-19 11:02:04
hplc的定蛋白多肽的技术文献应该有很多，你查阅就有了。当年日本岛津工作人员因此获得诺贝尔
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4楼2012-05-19 00:41:18
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藤萝紫蔓

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

HPLC我不知道，我们实验室有用LC/MC技术对蛋白进行定量的，利用蛋白的某个特征多肽进行定量。。。
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慢慢来，就能到达终点。
5楼2012-07-12 09:36:16
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 藤萝紫蔓 at 2012-07-12 09:36:16
HPLC我不知道，我们实验室有用LC/MC技术对蛋白进行定量的，利用蛋白的某个特征多肽进行定量。。。

谢谢你，我咨询了好多，答复都是不可以只用HPLC的，有用同位素标记和HPLC联用的
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6楼2012-07-13 15:09:16
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greatet

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有测蛋白的水性柱子。但你的样品不知道要怎么处理才能跟血浆蛋白分开。
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7楼2012-09-19 09:24:07
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七弦凝霜丶

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 阿娇阿娇 at 2012-07-13 15:09:16
谢谢你，我咨询了好多，答复都是不可以只用HPLC的，有用同位素标记和HPLC联用的...

想请问师姐，我做的一种18肽药物的药动，条件限制只能使用HPLC法，血浆样品沉淀萃取以后能和血浆蛋白基线分离，这样可以吗？绝对回收率60%左右这样可以吗
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8楼2019-01-07 13:02:39
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