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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 合成抗原纯化问题
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鬼豆虫

木虫 (正式写手)

[求助] 合成抗原纯化问题

小分子半抗原和BSA蛋白连接，形成全抗原后，怎么分离纯化？文献上全部是透析。可是有些小分子半抗原，还有DDC链接剂都不溶于水，可以透析除去吗？

[ Last edited by 鬼豆虫 on 2012-5-16 at 14:19 ]
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君子见机，达人知命
1楼2012-05-16 14:17:45
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鬼豆虫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-05-16 14:46:51:
不溶于水的离心，去沉淀，再透析不就行了。。如果是做免疫的话，直接打好了

嗯。但是我10000rpm离心20min，取上清4度静置一晚上，第二天10000rpm离心又出现少许沉淀。
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君子见机，达人知命
3楼2012-05-16 15:59:25
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鬼豆虫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Mimotopesdyc at 2012-05-16 16:13:24:
请问你所说的DDC是一种什么性质的东西？

N,N'-二环己基碳二亚胺
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君子见机，达人知命
5楼2012-05-16 16:40:00
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鬼豆虫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Mimotopesdyc at 2012-05-16 16:13:24:
请问你所说的DDC是一种什么性质的东西？

蜡装固体，很硬。不溶于水，溶于有机溶剂。
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君子见机，达人知命
6楼2012-05-16 16:41:09
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鬼豆虫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by jimmykaka at 2013-01-23 09:34:40
我也被这个问题困扰。
我有问题想请教一下。你溶解BSA的试剂是PBS吗？
如果是，那搅拌的时候，搅拌的介质就是PBS溶液了，可是你是怎么判断合成成功的完全抗原就存在于液相中，而沉淀中就没有合成好的抗原呢？

因为蛋白溶于水，小分子连上后就也溶了。如果连接的太多，才会析出。
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君子见机，达人知命
19楼2013-01-24 17:04:07
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