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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 合成抗原纯化问题
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Mimotopesdyc

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
11楼2012-05-17 14:39:46
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
鬼豆虫: 金币+3, ★★★很有帮助, 嗯。3Q。没用过PD脱盐柱，还要现买。 2012-05-18 08:33:35
实际上抗原合成后，透析交换缓冲液体系就好，去除合成过程中用到的一些有机溶剂，你要觉得透析不好的话，你也可以直接过PD-10脱盐柱啊，这个也是可以的。
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12楼2012-05-17 15:11:07
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
鬼豆虫: 金币+3, ★★★很有帮助, 嗯。直接免疫可能没问题。但是用来做elisa抗原，可能会影响吧... 2012-05-18 08:34:22
DCC就是个偶联剂，和EDC作用是一样的，只是EDC水溶性更好而已。楼主大可不必担心这个问题，及时免疫也没任何问题。
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13楼2012-05-17 15:14:44
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ciqql

新虫 (正式写手)
透析！
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14楼2012-05-17 16:59:43
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
鬼豆虫: 金币+4, ★★★很有帮助, 嗯。3Q。 2012-05-18 17:01:30
引用回帖:
13楼: Originally posted by 一步一步 at 2012-05-17 15:14:44:
DCC就是个偶联剂，和EDC作用是一样的，只是EDC水溶性更好而已。楼主大可不必担心这个问题，及时免疫也没任何问题。

你说的是做Elisa检测原的，这个我觉得影响也不是很大啊。本身你在做Elisa之前是透析过的，已经有一部分透析掉了，剩下的部分量也很少了，而且还要经过洗板等等。载体蛋白的空间位阻远比DCC大，偶联好的小分子在载体蛋白表面，应该是没有太大影响的。
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15楼2012-05-18 15:09:10
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华俊

金虫 (小有名气)
★
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-10-15 08:06:07
引用回帖:
8楼: Originally posted by longqingci at 2012-05-17 10:39:58
即使DCC不溶解，也可以通过透析除去。但通常为了透析更快，可以先离心，之透析上清即可。
小分子连接后，不可能被透析除去，剩下的没连接的化合物或者偶联臂或者DCC,EDC,NHS都可以被透析除去

请问这位姐姐，我的抗原是吸虫分泌抗原，有五个成分，其中最大的44KD，最小的25KD,我想把它连接到BSA上去，但不知道抗原结构，我该怎么办呢？是不是不知道结构就不能做半抗原偶联啦？谢谢
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多一份快乐少一分烦恼！
16楼2012-08-31 10:44:45
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三分之二

铜虫 (初入文坛)
★
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-10-15 08:06:15
引用回帖:
16楼: Originally posted by 华俊 at 2012-08-31 10:44:45
请问这位姐姐，我的抗原是吸虫分泌抗原，有五个成分，其中最大的44KD，最小的25KD,我想把它连接到BSA上去，但不知道抗原结构，我该怎么办呢？是不是不知道结构就不能做半抗原偶联啦？谢谢...

用scifiander也找不到吗
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17楼2012-10-14 21:42:34
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jimmykaka

铜虫 (小有名气)
我也被这个问题困扰。
我有问题想请教一下。你溶解BSA的试剂是PBS吗？
如果是，那搅拌的时候，搅拌的介质就是PBS溶液了，可是你是怎么判断合成成功的完全抗原就存在于液相中，而沉淀中就没有合成好的抗原呢？
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谁能挡我
18楼2013-01-23 09:34:40
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鬼豆虫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by jimmykaka at 2013-01-23 09:34:40
我也被这个问题困扰。
我有问题想请教一下。你溶解BSA的试剂是PBS吗？
如果是，那搅拌的时候，搅拌的介质就是PBS溶液了，可是你是怎么判断合成成功的完全抗原就存在于液相中，而沉淀中就没有合成好的抗原呢？

因为蛋白溶于水，小分子连上后就也溶了。如果连接的太多，才会析出。
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君子见机，达人知命
19楼2013-01-24 17:04:07
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