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storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛

[求助] 关于酶的保存问题

从sigma买了500UN的生物酶用来做实验用,但一次只用几个单位,不可能称量出来,请教学生物的朋友,这种情况应该怎么办?是否应该将买来的酶直接配在缓冲液中保存?在低温下结成冰影响吗?
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Don't give up and don't give in!
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peopole

银虫 (小有名气)

★ ★
看天: 金币+2, 鼓励分享 2012-05-16 18:26:54
建议分装,低温-20度保存。用的时候取需要量拿出来配置后使用。
2楼2012-05-16 09:48:28
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
storm8306: 金币+5 2012-05-16 11:21:02
silicare: BioEPI+1, 这是一般流程,有些酶需现用现配,不适合,所以要看说明书操作 2012-05-19 10:19:05
如果是粉剂:
1, 高速离心使你的酶离心在管底
2,加入对应的buffer稀释,之后分装
3,放置到-20(-80最好)冰箱,随取随用,尽量减少反复冻融
如果是液体,直接分装保存
好好做事,踏实做人!
4楼2012-05-16 10:25:05
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普通回帖

storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛

你的意思是直接把500单位的酶进行分装吗?还是溶解以后分装?因为我们条件有限,本身不是搞生物的,直接分装好像很困难哟。
Don't give up and don't give in!
3楼2012-05-16 10:13:22
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storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛

引用回帖:
4楼: Originally posted by ctt1984 at 2012-05-16 10:25:05:
如果是粉剂:
1, 高速离心使你的酶离心在管底
2,加入对应的buffer稀释,之后分装
3,放置到-20(-80最好)冰箱,随取随用,尽量减少反复冻融
如果是液体,直接分装保存

样品是冻干粉状态,为什么要离心?还有就是用玻璃瓶分装好呢还是塑料小试管好?因为我看有的说玻璃瓶不好
Don't give up and don't give in!
5楼2012-05-16 10:31:06
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

【答案】应助回帖

★ ★ ★
看天: 金币+3, 鼓励分享 2012-05-16 18:27:38
引用回帖:
5楼: Originally posted by storm8306 at 2012-05-16 10:31:06:
样品是冻干粉状态,为什么要离心?还有就是用玻璃瓶分装好呢还是塑料小试管好?因为我看有的说玻璃瓶不好

因为粉剂很容易在管盖和管壁,因此之前用最大转速转个5分钟使酶聚集到管底(最好是4度离心机)。至于装在什么里面分装,这个无所谓,玻璃瓶没什么影响。
大家一般使用1.5或者PCR管子来分装,因为你的酶不可能量很大。所以什么东西都可以用来分装,只要你用起来方便就好。
好好做事,踏实做人!
6楼2012-05-16 11:59:35
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看天

木虫 (知名作家)

sigma的网页上有相关产品的 product information 里面有一些关于样品保存和稳定性的建议
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
7楼2012-05-16 18:28:27
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storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛

引用回帖:
6楼: Originally posted by ctt1984 at 2012-05-16 11:59:35:
因为粉剂很容易在管盖和管壁,因此之前用最大转速转个5分钟使酶聚集到管底(最好是4度离心机)。至于装在什么里面分装,这个无所谓,玻璃瓶没什么影响。
大家一般使用1.5或者PCR管子来分装,因为你的酶不可能量 ...

还有一个问题就是解冻时一般在什么条件下解冻?多少温度?
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8楼2012-05-17 08:35:18
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

引用回帖:
8楼: Originally posted by storm8306 at 2012-05-17 08:35:18:
还有一个问题就是解冻时一般在什么条件下解冻?多少温度?

1,如果是甘油,DMSO之类的,根本就不会冻住,拿出来用了尽快放回去就可以。
2,如果是用其他缓冲液结冰的话,拿出来用手握一会就解冻了,用完赶快放回去。
总之尽量在冰上操作,还有就是在外界呆的时间越短越好,免得酶活失去。
好好做事,踏实做人!
9楼2012-05-17 12:09:44
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ciqql

新虫 (正式写手)


看说明书,配成浓度很高的母液,20度低温保存,或者做个分装,就可以了。千万别称量。
10楼2012-05-17 16:17:15
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