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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于酶的保存问题
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本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看

storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛

[求助] 关于酶的保存问题

从sigma买了500UN的生物酶用来做实验用，但一次只用几个单位，不可能称量出来，请教学生物的朋友，这种情况应该怎么办？是否应该将买来的酶直接配在缓冲液中保存？在低温下结成冰影响吗？
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Don't give up and don't give in!
1楼 2012-05-16 09:12:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

peopole

银虫 (小有名气)
★ ★
看天: 金币+2, 鼓励分享 2012-05-16 18:26:54
建议分装，低温-20度保存。用的时候取需要量拿出来配置后使用。
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2楼2012-05-16 09:48:28
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
storm8306: 金币+5 2012-05-16 11:21:02
silicare: BioEPI+1, 这是一般流程，有些酶需现用现配，不适合，所以要看说明书操作 2012-05-19 10:19:05
如果是粉剂：
1， 高速离心使你的酶离心在管底
2，加入对应的buffer稀释，之后分装
3，放置到-20（-80最好）冰箱，随取随用，尽量减少反复冻融
如果是液体，直接分装保存
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好好做事，踏实做人！
4楼2012-05-16 10:25:05
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普通回帖

storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛
你的意思是直接把500单位的酶进行分装吗？还是溶解以后分装？因为我们条件有限，本身不是搞生物的，直接分装好像很困难哟。
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Don't give up and don't give in!
3楼2012-05-16 10:13:22
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storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛
引用回帖:
4楼: Originally posted by ctt1984 at 2012-05-16 10:25:05:
如果是粉剂：
1， 高速离心使你的酶离心在管底
2，加入对应的buffer稀释，之后分装
3，放置到-20（-80最好）冰箱，随取随用，尽量减少反复冻融
如果是液体，直接分装保存

样品是冻干粉状态，为什么要离心？还有就是用玻璃瓶分装好呢还是塑料小试管好？因为我看有的说玻璃瓶不好
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Don't give up and don't give in!
5楼2012-05-16 10:31:06
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

【答案】应助回帖

★ ★ ★
看天: 金币+3, 鼓励分享 2012-05-16 18:27:38
引用回帖:
5楼: Originally posted by storm8306 at 2012-05-16 10:31:06:
样品是冻干粉状态，为什么要离心？还有就是用玻璃瓶分装好呢还是塑料小试管好？因为我看有的说玻璃瓶不好

因为粉剂很容易在管盖和管壁，因此之前用最大转速转个5分钟使酶聚集到管底（最好是4度离心机）。至于装在什么里面分装，这个无所谓，玻璃瓶没什么影响。
大家一般使用1.5或者PCR管子来分装，因为你的酶不可能量很大。所以什么东西都可以用来分装，只要你用起来方便就好。
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好好做事，踏实做人！
6楼2012-05-16 11:59:35
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看天

木虫 (知名作家)
sigma的网页上有相关产品的 product information 里面有一些关于样品保存和稳定性的建议
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
7楼2012-05-16 18:28:27
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storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛
引用回帖:
6楼: Originally posted by ctt1984 at 2012-05-16 11:59:35:
因为粉剂很容易在管盖和管壁，因此之前用最大转速转个5分钟使酶聚集到管底（最好是4度离心机）。至于装在什么里面分装，这个无所谓，玻璃瓶没什么影响。
大家一般使用1.5或者PCR管子来分装，因为你的酶不可能量 ...

还有一个问题就是解冻时一般在什么条件下解冻？多少温度？
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Don't give up and don't give in!
8楼2012-05-17 08:35:18
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者
引用回帖:
8楼: Originally posted by storm8306 at 2012-05-17 08:35:18:
还有一个问题就是解冻时一般在什么条件下解冻？多少温度？

1，如果是甘油，DMSO之类的，根本就不会冻住，拿出来用了尽快放回去就可以。
2，如果是用其他缓冲液结冰的话，拿出来用手握一会就解冻了，用完赶快放回去。
总之尽量在冰上操作，还有就是在外界呆的时间越短越好，免得酶活失去。
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好好做事，踏实做人！
9楼2012-05-17 12:09:44
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ciqql

新虫 (正式写手)
看说明书，配成浓度很高的母液，20度低温保存，或者做个分装，就可以了。千万别称量。
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10楼2012-05-17 16:17:15
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