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【求助/交流】求助:关于胶回收保存问题
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sailormoon8623
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[交流]
【求助/交流】求助:关于胶回收保存问题
已有3人参与
我现在想知道现在载体经过双酶切,胶回收保存能多久?还有PCR产物胶回收能保存多久???
因为我现在克隆的产物大小一个是2.1kb,另一个是3kb,连到pYES2上面出来的菌都是假的,好多都是载体自连。。。。郁闷死我了,我就是想问问是不是因为我的回收产物出现问题了??
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1楼
2010-04-27 15:36:17
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liyong1981
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专业: antibody
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-27 22:49
多切会,时间长一些,回收的时候注意点,最好做个阳性对照,就是没有连接的经过双酶切的载体,也转一下,看长不长,不长就说明酶切没有问题。祝 你成功
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2楼
2010-04-27 15:41:17
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dfl204
铁杆木虫
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注册: 2007-06-28
性别: GG
专业: 植物生理与生化
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
个人经验认为,酶切与PCR回收以后的产物保存于-20度是不会有什么影响的
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3楼
2010-04-27 15:42:46
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三磷酸腺苷
铁杆木虫
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专业: 神经系统肿瘤(含特殊感受
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scelab(金币+2):high hand~ :tiger23: 2010-04-27 22:49
按照TA克隆的经验,回收后放-20超过一周就会大量连不上,放3天效率就明显降低
其实就算放-20,DNA突出单链也还是蛮脆弱的
我一般切完马上连,不会放第二天
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4楼
2010-04-27 16:02:09
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