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522182809

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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现配现用吧,每次测试的时候,取一点点就够,然后测试看看酶活怎样,千万不要称量,不要用缓冲溶液保存,固体状态最好
凡事预则立不预则废
11楼2012-05-18 15:14:32
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522182809

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

固体酶,分装不方便,最好是先取现用,用缓冲溶液配制保存,容易失活,亲身经验
凡事预则立不预则废
12楼2012-05-18 15:17:03
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

sigma的酶都是配说明书的,所以你要先仔细研究说明书
13楼2012-05-19 10:20:46
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yajune

木虫 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ctt1984 at 2012-05-16 11:59:35:
因为粉剂很容易在管盖和管壁,因此之前用最大转速转个5分钟使酶聚集到管底(最好是4度离心机)。至于装在什么里面分装,这个无所谓,玻璃瓶没什么影响。
大家一般使用1.5或者PCR管子来分装,因为你的酶不可能量 ...

我问个问题,因为我最近也要用sigma买的酶。那离心的时候用什么管离心?sigma一般少量的样品是会放在一个小黑管里的,不能用那个离心吧,用离心管的话就得再转移,转移过程不会又损失么?
14楼2012-05-20 09:17:43
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yajune

木虫 (职业作家)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 522182809 at 2012-05-18 15:14:32:
现配现用吧,每次测试的时候,取一点点就够,然后测试看看酶活怎样,千万不要称量,不要用缓冲溶液保存,固体状态最好

我问一下,现配现用的话,怎么知道我取出的那些有多少单元的酶活?我是按照文献进行的反应,那个反应里加入的酶是按2U/ml加的。这样的话我应该怎么确定我加入了多少U?
15楼2012-05-20 09:24:41
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storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛

引用回帖:
12楼: Originally posted by 522182809 at 2012-05-18 15:17:03:
固体酶,分装不方便,最好是先取现用,用缓冲溶液配制保存,容易失活,亲身经验

我也有同感,第一次用酶,一直看不到效果,怀疑就是用缓冲液分装导致酶失活了,我的孔方兄啊!大家有没有什么好的分装方法,介绍下啊
Don't give up and don't give in!
16楼2012-05-22 15:32:26
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storm8306

木虫 (正式写手)

会飞的羽毛

引用回帖:
15楼: Originally posted by yajune at 2012-05-20 09:24:41:
我问一下,现配现用的话,怎么知道我取出的那些有多少单元的酶活?我是按照文献进行的反应,那个反应里加入的酶是按2U/ml加的。这样的话我应该怎么确定我加入了多少U?

我也很想知道,看了很多文献都没有说是怎么进行酶处理的,恼火啊
Don't give up and don't give in!
17楼2012-05-22 15:33:27
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