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qizongxian

金虫 (小有名气)

[求助] 关于原生质体制备的问题

各位虫友,霉菌制备原生质体是加酶液,我配制了蜗牛酶的酶液,纤维素酶的酶液,还有溶壁酶,可是加进去之后效果不好只能够达到10^4的数量级,这个级数做原生质体融合不够啊~我想请问一下 我的问题出在哪里?
补充:酶液配制有一个星期了,保存是在四度冰箱里,酶解时间是四个小时,酶解温度是30℃~
还有,请问你们是怎么制备原生质体的?我怎么都做不出来~~听烦躁的!~
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xuefangcg

铁虫 (正式写手)

哎~我也是这样,做了好长时间没有结果,我是做的杆菌的,酶解时间和甘氨酸浓度都不变,然后一次性做三个酶浓度,最后稀释涂布,我主要失败在于,24h培养后,不同酶浓度平板长出的菌落没有较大差异,而且不同稀释浓度长出的菌落也没有很大的差异,想知道除了稀释平板法还有什么别的方法可以衡量原生质体的制备率与再生率么?
21楼2012-10-21 19:18:43
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