应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 令人纠结的PCR,求高手指点
111/2返回列表12下一页
查看: 1568  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jocelyn2012

新虫 (初入文坛)

[交流] 令人纠结的PCR,求高手指点 已有8人参与

今天PCR,目标条带1500bp左右，模板是cDNA，68度延伸1min40s，结果出来了2000-3000bp（据marker）的条带，这如何是好？
注：cDNA P其他基因没有问题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-09 15:00:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔眼球

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主给出的信息还不够详细啦~目标片段不对，有可能是引物设计不对。最好能上图，这样大家才能更好地帮你解决问题。Good luck~
赞一下 回复此楼
2楼2012-05-09 15:58:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

可帅儿

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你引物的TM值是多少？
赞一下 回复此楼
追随自己的心！不要做让自己后悔的事！
3楼2012-05-09 16:41:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiong520

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
注意调节退火温度，与引物的Tm值有关的
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-09 16:54:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rny

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主的延伸温度好高啊，我们一般都不用这么高的
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-10 08:57:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyacinth326

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by rny at 2012-05-10 08:57:45:
楼主的延伸温度好高啊，我们一般都不用这么高的

这延伸温度还高啊，一般延伸不都72度么
赞一下 回复此楼
6楼2012-05-10 09:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rny

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不好意思，搞错了，你的退火温度多少啊？用的什么酶？
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-10 09:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rny

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我看大家P的目的片段长得时候才用68度延伸，你的也不是很长啊
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-10 09:16:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fly12365

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
估计是引物有问题，现在我也遇到了相同的问题，扩增1000bp的激发子片段，结果跑出2000多的片段，检查Tm，降低一下试试，跑个梯度确定一下温度。
赞一下 回复此楼
9楼2012-05-11 23:08:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiongyaoling

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
核对下引物，会不会是引物出了问题呢！
赞一下 回复此楼
10楼2012-05-12 09:36:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jocelyn2012 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +7 布布和一二 2026-08-06 10/500 2026-08-06 16:22 by janehuiminli
[基金申请] 听说今天filecode变了 +3 布布和一二 2026-08-06 3/150 2026-08-06 16:22 by yq199112088
[基金申请] filecode +8 等待解的谜 2026-08-06 12/600 2026-08-06 16:11 by janehuiminli
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +4 Tide man 2026-08-06 5/250 2026-08-06 16:08 by janehuiminli
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 12/600 2026-08-06 15:11 by eddyin
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[教师之家] 咨询面上基金 +4 李长云 2026-07-31 7/350 2026-08-06 11:20 by 李长云
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +22 低垂的野花 2026-07-31 30/1500 2026-08-05 18:03 by 低垂的野花
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +3 哈哈114477 2026-08-01 3/150 2026-08-04 15:40 by tegsgjy20
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭