24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1360  |  回复: 10

jocelyn2012

新虫 (初入文坛)

[交流] 令人纠结的PCR,求高手指点 已有8人参与

今天PCR,目标条带1500bp左右,模板是cDNA,68度延伸1min40s,结果出来了2000-3000bp(据marker)的条带,这如何是好?
注:cDNA P其他基因没有问题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔眼球

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主给出的信息还不够详细啦~目标片段不对,有可能是引物设计不对。最好能上图,这样大家才能更好地帮你解决问题。Good luck~
2楼2012-05-09 15:58:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

可帅儿

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问你引物的TM值是多少?
追随自己的心!不要做让自己后悔的事!
3楼2012-05-09 16:41:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiong520

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
注意调节退火温度,与引物的Tm值有关的
4楼2012-05-09 16:54:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rny

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主的延伸温度好高啊,我们一般都不用这么高的
5楼2012-05-10 08:57:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyacinth326

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by rny at 2012-05-10 08:57:45:
楼主的延伸温度好高啊,我们一般都不用这么高的

这延伸温度还高啊,一般延伸不都72度么
6楼2012-05-10 09:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rny

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不好意思,搞错了,你的退火温度多少啊?用的什么酶?
7楼2012-05-10 09:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rny

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我看大家P的目的片段长得时候才用68度延伸,你的也不是很长啊
8楼2012-05-10 09:16:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fly12365

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
估计是引物有问题,现在我也遇到了相同的问题,扩增1000bp的激发子片段,结果跑出2000多的片段,检查Tm,降低一下试试,跑个梯度确定一下温度。
9楼2012-05-11 23:08:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiongyaoling

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
核对下引物,会不会是引物出了问题呢!
10楼2012-05-12 09:36:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jocelyn2012 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 293求调剂 +4 勇远库爱314 2026-04-06 4/200 2026-04-10 11:00 by 高维春
[考研] 284求调剂 +18 梵@@ 2026-04-06 18/900 2026-04-10 10:12 by may_新宇
[考研] 085600材料与化工,求调剂 +11 won_qii 2026-04-07 11/550 2026-04-09 17:03 by luoyongfeng
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 085501机械英二77总分294求调剂,接受跨专业学习 +6 守法公民亓纪 2026-04-08 6/300 2026-04-09 15:55 by wp06
[考研] 0860004 求调剂 309分 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 14:06 by ditto77778
[考研] 285求调剂 +9 AZMK 2026-04-07 10/500 2026-04-09 10:29 by 小物理化学
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 生物工程求调剂 +13 喜欢还是不甘心 2026-04-05 13/650 2026-04-07 16:55 by Ecowxq666!
[考研] 305分求调剂 +3 哈_哈_哈_哈_哈 2026-04-04 5/250 2026-04-07 14:49 by 哈_哈_哈_哈_哈
[考研] 328求调剂 +4 ghhh88888 2026-04-06 5/250 2026-04-07 14:45 by ghhh88888
[考研] 复试调剂 +14 呼呼?~+123456 2026-04-05 14/700 2026-04-06 22:50 by chenzhimin
[考研] 化学357分,考研调剂 +11 .Starry. 2026-04-04 12/600 2026-04-06 06:28 by houyaoxu
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 283分求调剂 +7 小聂爱学习 2026-04-03 7/350 2026-04-04 21:51 by hemengdong
[考研] 0705理学294求调剂 +3 成果成果cg5 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:04 by simons1972
信息提示
请填处理意见