应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR 如何做到定量呢？
61/1返回列表
查看: 727  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dzwd

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR 如何做到定量呢？

我要做RT-qPCR，第一步是提取植物内的总RNA，这里出现个问题，参考步骤里边写的是取0.1g叶片，这个0.1怎么取啊？研磨的时候选用的是液氮，研钵上粘的满哪都是，我纠结了，有做过的吗？你们用的什么方法啊！望不吝赐教！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-09 14:20:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dzwd: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2012-05-09 14:53:22
这个量没必要那么精确啦，差不多就行了，反正还要有内参的
赞一下 回复此楼
2楼2012-05-09 14:49:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dzwd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zgb1982 at 2012-05-09 14:49:06:
这个量没必要那么精确啦，差不多就行了，反正还要有内参的

原来如此！
回复此楼
3楼2012-05-09 14:53:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
做反转录的时候，不同的样品使用同样量的RNA就可以啦。然后做PCR时使用同样量的cDNA做模板，最后，还有内参来矫正模板量差异。
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-09 17:33:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dzwd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-05-09 17:33:47:
做反转录的时候，不同的样品使用同样量的RNA就可以啦。然后做PCR时使用同样量的cDNA做模板，最后，还有内参来矫正模板量差异。

我是这么理解的，你看对不对哈。我要测定的是RNA表达量，首先得是取相同量的植物叶片，然后看下RNA量的多少，感觉这样才有意义啊！我先去仔细看看方法步骤吧，自己理解有误？
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-10 08:13:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dzwd at 2012-05-10 08:13:59:
我是这么理解的，你看对不对哈。我要测定的是RNA表达量，首先得是取相同量的植物叶片，然后看下RNA量的多少，感觉这样才有意义啊！我先去仔细看看方法步骤吧，自己理解有误？

是这样的，每一步都最好保证同样量，取叶片时当然也是。不过就算完全一样的样品分成两份来提，得到的RNA的量也会有所差异的。
赞一下 回复此楼
6楼2012-05-10 15:33:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员x4ipC2 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭