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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 贴壁细胞培养时为什么边缘不清
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smyoung

新虫 (小有名气)

[交流] 贴壁细胞培养时为什么边缘不清已有5人参与

我养的是MCF-7细胞，刚刚复苏时状态挺好的，传代一次或两次后，细胞的轮廓就看不太清了。最近经常这样。不知道该怎么办了。请各位指教！！！！！
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1楼2012-05-05 17:49:18
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是你冻存的细胞代数本来就很高，刚开始复苏可能形态还好，只要传代几次表型就可能发生变化，之前养过一些肿瘤细胞就是这样的，传代多了，形状都会发生变化的，只要不影响你的实验就OK啦
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我就是我
2楼2012-05-05 21:17:34
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smyoung

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wtyyyyy1988 at 2012-05-05 21:17:34:
可能是你冻存的细胞代数本来就很高，刚开始复苏可能形态还好，只要传代几次表型就可能发生变化，之前养过一些肿瘤细胞就是这样的，传代多了，形状都会发生变化的，只要不影响你的实验就OK啦

非常感谢
只是师姐养的细胞，轮廓就清晰。我养的细胞，就是轮廓发虚，所以不知道怎么办，能不能再给点建议
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3楼2012-05-05 22:14:22
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
telomerase: 金币+3, 辛苦辛苦。。。。。 2012-05-05 23:34:29
如果你用的东西和你师姐的全部一样，那有可能是操作原因，消化那一步的操作要恰到好处！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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我就是我
4楼2012-05-05 22:20:13
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胰酶笑话时间过长也会影响细胞形态，另外问问你师姐，培养条件和培养液有无区别。
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5楼2012-05-06 10:58:13
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smyoung

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by huguangdong at 2012-05-06 10:58:13:
胰酶笑话时间过长也会影响细胞形态，另外问问你师姐，培养条件和培养液有无区别。

O(∩_∩)O谢谢
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6楼2012-05-06 15:48:29
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smyoung

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wtyyyyy1988 at 2012-05-05 22:20:13:
如果你用的东西和你师姐的全部一样，那有可能是操作原因，消化那一步的操作要恰到好处！

非常感谢
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7楼2012-05-06 15:48:46
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hxs-520

金虫 (正式写手)

迷途小书虫
原因可能是
1，你的细胞系可能过老，复苏后细胞形态会不好。
2，培养基的浓度不同，细胞生长快，形态也会变，
3，如果持续这种状态，建议传完一代后，立刻进行你的实验。
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One world, one dream
8楼2012-05-06 18:49:43
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smyoung

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hxs-520 at 2012-05-06 18:49:43:
原因可能是
1，你的细胞系可能过老，复苏后细胞形态会不好。
2，培养基的浓度不同，细胞生长快，形态也会变，
3，如果持续这种状态，建议传完一代后，立刻进行你的实验。

刚刚复苏就实验吗？我做的是MTT实验，会不会对实验结果有影响？
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9楼2012-05-06 21:07:51
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hxs-520

金虫 (正式写手)

迷途小书虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by smyoung at 2012-05-06 14:07:51:
刚刚复苏就实验吗？我做的是MTT实验，会不会对实验结果有影响？

我觉得细胞2代之后就会正常生长，你可以对比不同代之间，比较一下。MTT这个方法我没做过，也不敢下结论，但是这些方法大多大同小异，对结果不会有很大影响
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One world, one dream
10楼2012-05-07 17:49:55
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