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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 17nt的DNA怎么就染不上色呀
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wlyanddmj

铜虫 (正式写手)

[求助] 17nt的DNA怎么就染不上色呀

求助各位大神，为什么我的17nt的单链DNA跑出来胶后怎么也染不上色，上样量达到500ng，染料是GelRed,染了50分钟都没啥效果。
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1楼 2012-05-03 11:54:41
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
http://hi.baidu.com/dorathy8317/ ... 6bc8b0c9eaf4cd.html
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5楼2012-05-03 17:28:07
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普通回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-03 13:57:35
嗯...............
       染料基本都是插入到双螺旋结构中才发光的吧，EB好像是插入到双螺旋的大沟位置，GelRed就不知道了，所以我想你的单链DNA要是没有二级结构 或没有互补的情况下 可能是无法染色的
       个人看法 若有所错请高手指点
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Let God do with it as He wills
2楼2012-05-03 13:07:26
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
17 nt，这么小，怎么跑，没有自身形成二级结构，速度会很快，都跑出去了。
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Thank-you，so-blue.
3楼2012-05-03 15:56:20
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2楼正解。单链DNA一般用聚丙酰胺凝胶电泳，采用银染法哦
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4楼2012-05-03 17:24:13
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wlyanddmj

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by susizheng at 2012-05-03 15:56:20:
17 nt，这么小，怎么跑，没有自身形成二级结构，速度会很快，都跑出去了。

15%的聚丙烯酰胺胶，跑不出去的……
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6楼2012-05-11 11:02:48
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wlyanddmj

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-05-03 17:28:07:
http://hi.baidu.com/dorathy8317/blog/item/ff66899b3b6bc8b0c9eaf4cd.html

谢谢！
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7楼2012-05-11 11:03:39
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wlyanddmj

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-05-03 17:24:13:
2楼正解。单链DNA一般用聚丙酰胺凝胶电泳，采用银染法哦

银染色法很麻烦的，跟GelRed比起来，有点out了吧……
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8楼2012-05-11 11:37:59
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wlyanddmj at 2012-05-11 11:37:59:
银染色法很麻烦的，跟GelRed比起来，有点out了吧……

GelRed没用过，你确定它能染单链？
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9楼2012-05-11 15:08:56
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wlyanddmj

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-05-11 15:08:56:
GelRed没用过，你确定它能染单链？

对呀，最近一直在用，很简单的，染20分钟左右，就可以直接去照胶了。
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10楼2012-05-12 15:46:21
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