24小时热门版块排行榜    

查看: 3054  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

明辨是非

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒小提的试剂盒一个柱子最多能提多少ml的菌液啊

我们实验室比较穷一些做转染嫌去内毒素的大提试剂盒太贵了只能用平时的质粒小提试剂盒代替 之前的师哥用此法做转染虽然转染率低但是也成功了
实验室为了节省柱子师哥师姐们都是反复使用的 不知道用没有同样做法的虫友 想请教下要是提100ml的菌液(DH5α)最少用几个吸附柱啊 或者说一个吸附柱最多能处理多少ml的菌液 我们的试剂盒是biomiga的pd1211-01 按说明书上来是一个柱子1~4ml的菌液
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaovt714

金虫 (小有名气)

看你菌液浓度~~~我们一般菌体量少的话,一个EP管里加两次菌液离心。。。
9楼2012-05-05 20:34:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-03 13:52:23
明辨是非: 金币+5, ★★★很有帮助, 好的 我试了下 菌液多的 跑出来更亮 2012-05-05 16:46:46
一般就是不超过4ml。我为了尽可能得到更多的质粒,也常用4ml,但从没敢更多。

个人感觉:小提试剂盒往往很难满足要求。如果转染率不高,逼得后面做G418筛选之类的事,那就得不偿失了。用不起Qiagen,天根也行啊。
2楼2012-05-02 23:23:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-03 13:52:32
每个柱子有它本身最大的结合质粒能力(可从厂家处获得)。如30ug。
理论上讲,如果1ml菌里有1ug质粒,则可以用30ml的菌制的上清过一个柱子(裂解液那些要按比例增加即你不能用裂解4ml的体系来裂解30ml菌)。但柱子的另外的一个问题是会产生堵塞:杂质太多或太粘稠容易堵,视上清情况而定。
故,究竟可以使用多少的菌液仍需要你自己的摸索。而不同的菌或不同的质粒肯定也不一样。
伟大航线....
3楼2012-05-03 08:59:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个与菌液没有关系吧,与质粒DNA的量有关,每个柱子都有一定的承载量
4楼2012-05-03 09:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +17 基诺咪客 2026-08-17 22/1100 2026-08-20 16:47 by 基诺咪客
[基金申请] 时间戳又变了 +11 wuchongjun 2026-08-20 14/700 2026-08-20 16:26 by 虫友是什么虫
[基金申请] 科研孤儿太难了 +4 我4大白菜 2026-08-20 4/200 2026-08-20 15:58 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +9 zju2000 2026-08-16 10/500 2026-08-20 15:56 by Leogzhya
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +16 Ldrop2023 2026-08-13 20/1000 2026-08-20 11:07 by xskun
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 21/1050 2026-08-20 10:37 by Vivilian
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见