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明辨是非

银虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 211.5
散金: 2
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在线: 19.9小时
虫号: 1480854
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性别: GG

[求助] 质粒小提的试剂盒一个柱子最多能提多少ml的菌液啊

我们实验室比较穷一些做转染嫌去内毒素的大提试剂盒太贵了只能用平时的质粒小提试剂盒代替之前的师哥用此法做转染虽然转染率低但是也成功了
实验室为了节省柱子师哥师姐们都是反复使用的不知道用没有同样做法的虫友想请教下要是提100ml的菌液（DH5α）最少用几个吸附柱啊或者说一个吸附柱最多能处理多少ml的菌液我们的试剂盒是biomiga的pd1211－01 按说明书上来是一个柱子1～4ml的菌液

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1楼 2012-05-02 21:19:09

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longrna

新虫 (正式写手)

MolEPI: 7
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专业: 生物化学

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-03 13:52:32

每个柱子有它本身最大的结合质粒能力（可从厂家处获得）。如30ug。
理论上讲，如果1ml菌里有1ug质粒，则可以用30ml的菌制的上清过一个柱子（裂解液那些要按比例增加即你不能用裂解4ml的体系来裂解30ml菌）。但柱子的另外的一个问题是会产生堵塞：杂质太多或太粘稠容易堵，视上清情况而定。
故，究竟可以使用多少的菌液仍需要你自己的摸索。而不同的菌或不同的质粒肯定也不一样。