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[交流]
小麦叶片胞间液蛋白的提取
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| 大家有做过小麦胞间液蛋白提取的吗？需要一种不用太多材料的方法，看了一些文献都是需要500 g，我要做的处理有点多，这么大的量恐怕不行。所以来求助大家！ |
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starseacow
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jhu132llh: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励积极交流 2012-05-05 18:38:18
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参照王庆梅等制备细胞间隙液的方法[10]。细胞间 隙液是从接种叶锈菌小种165 后5 d 的洛夫林10 小麦 叶片中提取的，记作IWF165，具有激发子诱导活性。 同时提取健康小麦叶片的IWF 作为对照，记作IWFCK。 具体操作如下：取小麦第一片叶片，自叶尖端切除0.5 cm，之后将叶片切成约4 cm 长叶段，切口断面用重 蒸水冲洗两遍，用细线轻轻捆扎成束，置于烧杯中， 上面覆以洁净重物，用4℃预冷的重蒸水浸没，用真 空泵抽气10 min。待叶片呈暗绿色水渍状，取出于室 温晾至叶片表面无附水，摆成2～3 层夹于两层塑料薄 膜条之间，卷绕在长8 cm，直径1.8 cm 的塑料管上， 以棉线扎紧，置于底部有一带孔塑料隔片的50 ml 大 离心管中，1 000 r/min 离心12 min，收集IWF 并再次 以1 000 r/min 离心5min，去除细胞碎片，测定蛋白质 含量。 http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=12299732dtke8ujdj07mlkb1 |
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