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lihui_2004

金虫 (小有名气)


[交流] 小麦叶片胞间液蛋白的提取

大家有做过小麦胞间液蛋白提取的吗?需要一种不用太多材料的方法,看了一些文献都是需要500 g,我要做的处理有点多,这么大的量恐怕不行。所以来求助大家!
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
jhu132llh: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励积极交流 2012-05-05 18:38:18
参照王庆梅等制备细胞间隙液的方法[10]。细胞间
隙液是从接种叶锈菌小种165 后5 d 的洛夫林10 小麦
叶片中提取的,记作IWF165,具有激发子诱导活性。
同时提取健康小麦叶片的IWF 作为对照,记作IWFCK。
具体操作如下:取小麦第一片叶片,自叶尖端切除0.5
cm,之后将叶片切成约4 cm 长叶段,切口断面用重
蒸水冲洗两遍,用细线轻轻捆扎成束,置于烧杯中,
上面覆以洁净重物,用4℃预冷的重蒸水浸没,用真
空泵抽气10 min。待叶片呈暗绿色水渍状,取出于室
温晾至叶片表面无附水,摆成2~3 层夹于两层塑料薄
膜条之间,卷绕在长8 cm,直径1.8 cm 的塑料管上,
以棉线扎紧,置于底部有一带孔塑料隔片的50 ml 大
离心管中,1 000 r/min 离心12 min,收集IWF 并再次
以1 000 r/min 离心5min,去除细胞碎片,测定蛋白质
含量。

http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=12299732dtke8ujdj07mlkb1

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4楼2012-05-03 22:58:34
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lihui_2004

金虫 (小有名气)


送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-03 22:58:34:
参照王庆梅等制备细胞间隙液的方法。细胞间
隙液是从接种叶锈菌小种165 后5 d 的洛夫林10 小麦
叶片中提取的,记作IWF165,具有激发子诱导活性。
同时提取健康小麦叶片的IWF 作为对照,记作IWFCK。
具体操作如 ...

嗯,之前看了这篇文献了,我的目的主要是测定不同处理下胞间液蛋白种类,如果提出来的总量少的话估计不行,先做预实验看看了
5楼2012-05-05 10:23:23
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简单回复
2012-05-02 22:23   回复  
2012-05-03 11:22   回复  
引用回帖:
2楼: Originally posted by yingying1588 at 2012-05-02 22:23:06:

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