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lihui_2004

金虫 (小有名气)

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[交流] 小麦叶片胞间液蛋白的提取

大家有做过小麦胞间液蛋白提取的吗？需要一种不用太多材料的方法，看了一些文献都是需要500 g，我要做的处理有点多，这么大的量恐怕不行。所以来求助大家！

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1楼 2012-05-02 21:00:34

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starseacow

专家顾问 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
jhu132llh: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励积极交流 2012-05-05 18:38:18

参照王庆梅等制备细胞间隙液的方法[10]。细胞间
隙液是从接种叶锈菌小种165 后5 d 的洛夫林10 小麦
叶片中提取的，记作IWF165，具有激发子诱导活性。
同时提取健康小麦叶片的IWF 作为对照，记作IWFCK。
具体操作如下：取小麦第一片叶片，自叶尖端切除0.5
cm，之后将叶片切成约4 cm 长叶段，切口断面用重
蒸水冲洗两遍，用细线轻轻捆扎成束，置于烧杯中，
上面覆以洁净重物，用4℃预冷的重蒸水浸没，用真
空泵抽气10 min。待叶片呈暗绿色水渍状，取出于室
温晾至叶片表面无附水，摆成2～3 层夹于两层塑料薄
膜条之间，卷绕在长8 cm，直径1.8 cm 的塑料管上，
以棉线扎紧，置于底部有一带孔塑料隔片的50 ml 大
离心管中，1 000 r/min 离心12 min，收集IWF 并再次
以1 000 r/min 离心5min，去除细胞碎片，测定蛋白质
含量。

http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=12299732dtke8ujdj07mlkb1

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lihui_2004

4楼2012-05-03 22:58:34

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lihui_2004

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引用回帖:

4楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-03 22:58:34:
参照王庆梅等制备细胞间隙液的方法。细胞间
隙液是从接种叶锈菌小种165 后5 d 的洛夫林10 小麦
叶片中提取的，记作IWF165，具有激发子诱导活性。
同时提取健康小麦叶片的IWF 作为对照，记作IWFCK。
具体操作如 ...

嗯，之前看了这篇文献了，我的目的主要是测定不同处理下胞间液蛋白种类，如果提出来的总量少的话估计不行，先做预实验看看了

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5楼2012-05-05 10:23:23

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yingying15882楼

2012-05-02 22:23 回复