| 查看: 1681 | 回复: 8 | |||
[求助]
M13噬菌体DNA提取
|
|
求助： 1、70%乙醇洗涤，体积多少比较合适？真空干燥，没有真空干燥设备，有没有什么方法可以代替？ 2、离心转速是14000rpm还是10000rpm？ 3、如果送公司测序，一般浓度多大比较好？ [ Last edited by zzl20070 on 2012-5-2 at 18:51 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
职称评审没过，求安慰
已经有56人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有5人回复
-
26申博自荐
已经有3人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 细菌基因组DNA提取 交流
已经有18人回复
- 用DNAmarker制备噬菌体
已经有4人回复
- 基因组DNA提取问题
已经有32人回复
- 噬菌体DNA提取问题
已经有4人回复
- 噬菌体DNA提取
已经有12人回复
- 【求助/交流】M13K07的扩增方法
已经有3人回复
- 【求助/交流】噬菌体DNA提取，电泳结果显示不止一条带，等待高手指点
已经有7人回复
- 微生物学考研资料1(沈萍版同步）免币分享
已经有67人回复
yuluoqiutong
木虫 (正式写手)
初出茅庐
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 2279.9
- 散金: 116
- 红花: 1
- 帖子: 319
- 在线: 70.9小时
- 虫号: 1737786
- 注册: 2012-04-05
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2012-05-03 09:48:41
3楼2012-05-03 10:36:16
4楼2012-05-03 17:28:59
|
I 挑单克隆，摇床4.5h，200r，离心30sec后，将上清500μl 含噬 菌体上清转入一新鲜离心管。 II 加 200μl PEG/NaCl，颠倒混匀，室温放置 10min。 III 14000rpm 4°c离心 10min，弃上清液。 IV 短暂离心，小心吸去残余上清。 V 沉淀物彻底重悬于 100μl 碘化物缓冲液中，加入 250μl 乙醇。室温温育10min。短时间的室温温育使单链噬菌体 DNA 沉淀而大多数噬菌体蛋白保持在溶液中。 VI 14000rpm 4°c离心 10min，弃上清。用 70%的乙醇洗沉淀，离心12000rpm 5min 吸净干燥（这个离心数和二楼的不一样，你可以都试试） VII 沉淀重悬于 30μl 双蒸水中贮存。 |
5楼2012-05-03 17:34:13
yuluoqiutong
木虫 (正式写手)
初出茅庐
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 2279.9
- 散金: 116
- 红花: 1
- 帖子: 319
- 在线: 70.9小时
- 虫号: 1737786
- 注册: 2012-04-05
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2012-05-04 09:11:15
7楼2012-05-04 14:36:03
8楼2015-06-12 10:22:05
baby1_9253344
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 3872.7
- 散金: 53
- 红花: 1
- 帖子: 287
- 在线: 519小时
- 虫号: 535686
- 注册: 2008-03-29
- 性别: MM
- 专业: 样品前处理方法与技术
9楼2015-07-17 11:09:05