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怎样判断DEAE-纤维素柱上样超载?急求!!
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崔宁
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[
求助
]
怎样判断DEAE-纤维素柱上样超载?急求!!
最近在做多糖的分离与纯化,用DEAE-纤维素52柱分离,先用蒸馏水洗脱中性糖,再用缓冲液洗脱酸性糖,因为要制备均一多糖,所以想摸一个柱子的最大载样量。可是如何判断上样超载那?非常感谢!!
我自己想到这样一种方法:如果上样超载柱子不能吸附多余的酸性糖,那摩酸性糖就会随中性糖一起被蒸馏水洗脱下来,我可以先后上样两次,其中一次上样量足够小、保证不会超载,另外一次增大上样量,如果两次蒸馏水洗脱出来的质量按比例吻合,则说明没有超载,否则认为超载。我想的这种方法可以吗?还有各位高人还有其他的方法吗?
非常非常感谢!!!
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2012-05-02 13:35:46
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新虫
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【答案】应助回帖
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5楼
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Originally posted by
崔宁
at 2012-05-03 10:40:37
谢谢你,明白流穿是指的神魔了,也明白你的应助意思了。呵呵,谢谢,我是一个新手请见谅。
...
上样速度也有关系,太快也挂不稳会被冲下来,可以用DOE的方法摸一摸速度和上样量。
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8楼
2013-04-19 13:36:26
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lihuan0525
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
这还不容易,一直上样,然后测流穿,当流穿里有目的蛋白后就可以了
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2012-05-02 14:26:09
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崔宁
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2楼
:
Originally posted by
lihuan0525
at 2012-05-02 14:26:09:
这还不容易,一直上样,然后测流穿,当流穿里有目的蛋白后就可以了
你好,谢谢你的回复,不过神魔是流穿?能详细说一下嘛?还有我做的是多糖,非常感谢!!
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3楼
2012-05-02 19:26:29
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丁晓菲
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
一直上样,上多糖,足够过量的多糖,这个含量是已知的,
测穿透峰里的多糖含量,两者一相减,剩下的不就是吸附的量了么。。。
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尽负千重罪,练就不死心
4楼
2012-05-03 09:27:35
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