| 查看: 3132 | 回复: 23 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
liuxueyan21金虫 (小有名气)
|
[求助]
考马斯亮蓝法测定蛋白过程中的问题
|
|
|
各位师兄师姐，紧急求助，就是用考马斯亮蓝法测定土壤蛋白，但是不管是预实验还是正式试验，测定的结果并不相同，尽管重复了很多次，不知道问题出哪里了？忘各位师兄师姐帮帮忙。 1、标准曲线时，BSA是需要每次测定都要重新配制吗？在测样品的时候是直接加100ul待测样品，其他与标准曲线一样。 2、提取的土壤蛋白储存在4°冰箱中，放置一个礼拜左右，对测定结果有影响么？还是会有蛋白变性的可能性？还是提取完成后放置在-20°条件？ 3、考马斯染液反应时间为10min，并在一个小时之内测定完成，这个时间是不是有问题？ |
回复此楼» 猜你喜欢
有爆料，一个青年教师卖房得400万，然后换了一个四青帽子
已经有3人回复
-
化学工程调剂289
已经有28人回复
-
328求调剂
已经有17人回复
-
材料类284调剂
已经有7人回复
-
334求调剂
已经有8人回复
-
085600材料与化工专硕329 求调剂
已经有22人回复
-
070300化学279求调剂
已经有9人回复
-
土木水利专硕276分求调剂
已经有9人回复
-
331求调剂
已经有3人回复
-
材料与化工专硕306分找合适调剂
已经有24人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助：关于考马斯亮蓝法测定蛋白质
已经有23人回复
- 考马斯亮蓝测定蛋白的结果受蛋白的分子量大小的影响吗？
已经有9人回复
- 考马斯亮蓝法测蛋白含量时吸光度A595nm为负值！！！求助
已经有11人回复
- 考马斯亮蓝法测蛋白质含量
已经有12人回复
- 【求助/交流】请问做蛋白质消化用考马斯亮蓝法还是福林-酚法检测好？
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于考马斯亮蓝法测蛋白质含量
已经有4人回复
- 【求助/交流】考马斯亮蓝法可以测得多糖中的结合糖蛋白么?
已经有4人回复
- 【求助/交流】考马斯亮蓝法测定蛋白质的标准曲线
已经有9人回复
- 【求助/交流】[求助]考马斯亮蓝法测定蛋白质的问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】关于考马斯亮蓝法测定蛋白含量的问题
已经有18人回复
gywyl1977
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 2
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 2590.7
- 红花: 3
- 帖子: 548
- 在线: 41.6小时
- 虫号: 1631149
- 注册: 2012-02-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
★
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-06-08 10:27:59
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-06-08 10:27:59
|
1) BSA需要一批多配些，分装在棕色瓶中，4度保存。做标准曲线不需要每次都重配，但做好每一瓶做好标准曲线后尽快用掉。启用另一瓶时，如果间隔时间长，需要重新做标准曲线； 2）蛋白提取后肯定要冷冻保存。 3）显色反应一般都在半小时以内。 |
liuxueyan214楼2012-06-06 00:35:09
suruijing
木虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 3750.1
- 散金: 777
- 红花: 2
- 帖子: 808
- 在线: 422.1小时
- 虫号: 1087003
- 注册: 2010-09-01
- 性别: MM
- 专业: 污染控制化学
2楼2012-06-05 19:01:56
【答案】应助回帖
★
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-05 22:19:17
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-05 22:19:17
| 4度放置时间长了肯定有问题，这个温度下有一部分蛋白酶还是有活性的。土壤中的其他物质有可能对考染的结果产生影响。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
3楼2012-06-05 21:27:06
protein_
木虫 (小有名气)
- MicEPI: 1
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2048.2
- 红花: 2
- 帖子: 123
- 在线: 41.6小时
- 虫号: 1179923
- 注册: 2010-12-29
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-06-08 10:28:10
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-06-08 10:28:10
| 考马斯亮蓝测定蛋白质的原理是测定蛋白质疏水基团的数量来定蛋白质含量，有一定的误差，随着时间的推移有可能你的样品中的蛋白质可能在分解，样品做出来肯定要冷冻，你可以一次多做点平行，真不行就定氮测定，就是麻烦点，祝好运 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
5楼2012-06-08 10:23:05
