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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 兼并引物的退火温度
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huangdi5217

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 兼并引物的退火温度

请问一下，兼并引物的退火温度如何计算？有计算公式或者网站吗？谢谢大家！
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1楼 2012-04-24 17:48:42
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-25 13:38:30
huangdi5217: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-25 19:23:36
兼并引物有很多条，设计引物回来给的Tm值只是当做一个参考，我做的时候都是温度先低一些， 看看非特异性带多不多，一般都是设计梯度，看看哪个温度好就用哪个。
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未来不是梦
2楼2012-04-24 19:07:36
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jingdejun

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-04-25 13:38:42
huangdi5217: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-25 19:24:00
以兼并引物Tm的平均值减去5度的温度为中心，设计一个温度范围，做梯度PCR，应该就可以了。
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3楼2012-04-24 21:39:35
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chibang1220

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
huangdi5217: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-04-25 19:24:29
好像是根据剪辑数目确定的，你问问师兄货师姐，做这个的都知道
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人的差别在于业余时间
4楼2012-04-24 21:58:09
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z888r111

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
huangdi5217: 金币+1, ★有帮助 2012-05-16 11:27:06
兼并引物上下游退火温度应为多少才合适呢？
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坚持
5楼2012-05-09 20:49:22
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huangdi5217

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by z888r111 at 2012-05-09 20:49:22:
兼并引物上下游退火温度应为多少才合适呢？

两条引物退火温度不能相差太大
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6楼2012-05-10 11:38:41
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