[求助] 兼并引物的退火温度

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1楼2012-04-24 17:48:42

z888r111

铁虫 (初入文坛)

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huangdi5217: 金币+1, ★有帮助 2012-05-16 11:27:06

兼并引物上下游退火温度应为多少才合适呢？

坚持

5楼2012-05-09 20:49:22

查看全部 6 个回答

张宏宇123

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huangdi5217: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-25 19:23:36

兼并引物有很多条，设计引物回来给的Tm值只是当做一个参考，我做的时候都是温度先低一些，看看非特异性带多不多，一般都是设计梯度，看看哪个温度好就用哪个。

未来不是梦

2楼2012-04-24 19:07:36

jingdejun

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huangdi5217: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-25 19:24:00

以兼并引物Tm的平均值减去5度的温度为中心，设计一个温度范围，做梯度PCR，应该就可以了。

3楼2012-04-24 21:39:35

chibang1220

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huangdi5217: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-04-25 19:24:29

好像是根据剪辑数目确定的，你问问师兄货师姐，做这个的都知道

人的差别在于业余时间

4楼2012-04-24 21:58:09