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329939815

木虫 (正式写手)

[求助] 求助:关于考马斯亮蓝法测定蛋白质

本人最近测牛血清蛋白(1mg/ml),100微升(加入3ml考马斯亮蓝)的吸光度只有0.332。
相关系数0.9866,奔溃!
                                  第一次做这个东西,迷茫了,不知道出了什么问题!
有没有在武汉的学校用这种方法测蛋白的虫友呀?求认识...求教!急,谢谢!!!!!
本人在武汉...继续请教,谢谢!
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wc4646

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
329939815: 金币+3, 有帮助 2012-06-24 23:49:13
329939815: 金币+2 2012-06-24 23:50:07
1. 考马斯亮蓝工作液需要过滤,配制时选用超纯水配制。配制后不可放置时间过长。
2. 牛血清蛋白精确定量,可以将其测定体积扩大至0.5ml+0.5ml超纯水+2ml考马斯亮蓝工作液。
3. 确定测定仪器及条件无误。595nm处测定,仪器参数常规设置。
4. 实验至少3次重复,求其平均值进行计算分析。
祝好!
15楼2012-04-20 13:01:37
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wc4646

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

另外,测定蛋白含量一般用的都是考马斯亮蓝G-250,没听说用R-250的
16楼2012-04-20 13:03:38
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wc4646

木虫 (正式写手)

引用回帖:
22楼: Originally posted by alice1989898 at 2014-10-07 20:18:56
您好,我想问一下,考马斯亮蓝液过滤是怎样操作的啊,谢谢...

定性滤纸直接过滤就可以了。
23楼2014-10-08 11:55:25
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