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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » EB染色DNA电泳实验，溴酚蓝孔道出现亮条带
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cctt0661

木虫 (小有名气)

[求助] EB染色DNA电泳实验，溴酚蓝孔道出现亮条带

EB染色DNA电泳实验，溴酚蓝孔道内只加入了溴酚蓝、水和甘油。但在凝胶成像仪中发现该孔道有亮条带，这是怎么回事啊？
重复两次，现象相同。
有做过的吗？也是这样现象吗？
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1楼 2012-04-19 11:38:39
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320080920001

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+2, 可以详细分析一下的啊 2012-04-19 15:52:38
应该是你的loading buffer DNA污染吧
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2楼2012-04-19 14:57:40
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cctt0661

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 320080920001 at 2012-04-19 14:57:40:
应该是你的loading buffer DNA污染吧

也就是说EB和溴酚蓝是不会显色的？
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3楼2012-04-19 16:42:29
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YZQ_XM

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不会啊，没有东西显什么色，应该是污染了。
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4楼2012-04-19 16:55:20
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cctt0661

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by YZQ_XM at 2012-04-19 16:55:20:
不会啊，没有东西显什么色，应该是污染了。

可是我做的时候很小心的，而且加入溴酚蓝的那个孔道比加纯DNA的孔道还要亮，如果污染的话应该没纯的DNA亮啊？
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5楼2012-04-19 22:47:12
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320080920001

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得你换一管新的loading 用用就知道原因了
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6楼2012-04-20 01:51:23
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换一个buffer试一试，缓冲液不会自显色，有核酸才会显色。是不是温度过高  扩散了  可以传一张照片看看
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快乐奋斗，创造所有。
7楼2012-04-20 11:16:22
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zhaoyonggang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的亮带有多大？100bp左右？条带是否比较模糊，不像DNA条带那么清晰尖锐？如果是这种情况，可能是buffer的浓度问题（可能过稀了，具体我也没有仔细探究过，应该与buffer和胶的离子浓度的匹配有关）。这个一般不影响电泳结果。
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8楼2012-04-20 11:25:05
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cctt0661

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 跳跳鱼 at 2012-04-20 11:16:22:
换一个buffer试一试，缓冲液不会自显色，有核酸才会显色。是不是温度过高  扩散了  可以传一张照片看看

左2为溴酚蓝，左三为纯DNA，亮度差别挺大的
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9楼2012-04-20 15:36:26
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cctt0661

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhaoyonggang at 2012-04-20 11:25:05:
你的亮带有多大？100bp左右？条带是否比较模糊，不像DNA条带那么清晰尖锐？如果是这种情况，可能是buffer的浓度问题（可能过稀了，具体我也没有仔细探究过，应该与buffer和胶的离子浓度的匹配有关）。这个一般不影 ...

条带不模糊，比纯的DNA还要清晰，已上传照片，你做没出现过吧？
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10楼2012-04-20 15:38:50
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