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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 关于eb和dna 的荧光替代滴定实验
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rebecco1987

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于eb和dna 的荧光替代滴定实验

我做ct dna 和小分子的相互作用 我用紫外和荧光测定 验证一些实验 之前买了sigma的ctdna 是有钠盐的那种 货号d1501  是分装的100mg  还有两种货号是d4522和d4764  我不知道做这种实验用哪种最好  
问题二  我用d1501 溶解的时候没有遇到大家说的溶解问题 （50mm tris－hcl ph6.8）
问题三 我现在做ctdna和小檗碱的结合 按理说是结合很强才对 用宝生物合成的双链做出来的结果很好  相比之下ctdna变化率很小 是不是我这个dna是假的啊。。。。

最主要的 问题四 做dna－eb体系的荧光替代实验 发现在eb浓度很低 dna浓度很好的时候 激发为520 发射为600左右的时候 加了小檗碱 变化很小 但是在激发为340的时候 变化率很大 这是为什么 和文献好像差的很多啊，。。。
求有经验的帮助啊
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1楼 2011-08-20 22:01:54
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

rebecco1987(金币+1): 2011-12-08 16:25:13
可能是小檗碱影响，你单独测定一下小檗碱的荧光（340nmEx）
应该会发现问题！
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2楼2011-09-01 18:32:57
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rebecco1987

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chaijudi at 2011-09-01 18:32:57:
可能是小檗碱影响，你单独测定一下小檗碱的荧光（340nmEx）
应该会发现问题！

用小檗碱 ex340 的确有萤光 可是我用得是ex520 小檗碱没有得哦
另外 你做紫外的实验吗 我也有些问题 黄酮和dna反应 应该看到微弱的红移减色效应 可是我用sigma的ct－dna 没有看到这个结果 我不知道是什么原因 ph是6.8
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3楼2011-10-10 11:10:53
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)
物质的性质，没办法！
估计两种DNA的结果有差异，
建议看一下杨频教授的相关书籍和论文！
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4楼2011-10-10 13:52:51
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rebecco1987

新虫 (初入文坛)
不知道 我想问问做过相关实验的人 呵呵 谢谢您 看别人的文献做出来的结果和我的不一样
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5楼2011-10-10 18:49:53
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