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rebecco1987

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于eb和dna 的荧光替代滴定实验

我做ct dna 和小分子的相互作用 我用紫外和荧光测定 验证一些实验 之前买了sigma的ctdna 是有钠盐的那种 货号d1501  是分装的100mg  还有两种货号是d4522和d4764  我不知道做这种实验用哪种最好  
问题二  我用d1501 溶解的时候没有遇到大家说的溶解问题 (50mm tris-hcl ph6.8)
问题三 我现在做ctdna和小檗碱的结合 按理说是结合很强才对 用宝生物合成的双链做出来的结果很好  相比之下ctdna变化率很小 是不是我这个dna是假的啊。。。。

最主要的 问题四 做dna-eb体系的荧光替代实验 发现在eb浓度很低 dna浓度很好的时候 激发为520 发射为600左右的时候 加了小檗碱 变化很小 但是在激发为340的时候 变化率很大 这是为什么 和文献好像差的很多啊,。。。
求有经验的帮助啊
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

rebecco1987(金币+1): 2011-12-08 16:25:13
可能是小檗碱影响,你单独测定一下小檗碱的荧光(340nmEx)
应该会发现问题!
2楼2011-09-01 18:32:57
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rebecco1987

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chaijudi at 2011-09-01 18:32:57:
可能是小檗碱影响,你单独测定一下小檗碱的荧光(340nmEx)
应该会发现问题!

用小檗碱 ex340 的确有萤光 可是我用得是ex520 小檗碱没有得哦
另外 你做紫外的实验吗 我也有些问题 黄酮和dna反应 应该看到微弱的红移减色效应 可是我用sigma的ct-dna 没有看到这个结果 我不知道是什么原因 ph是6.8
3楼2011-10-10 11:10:53
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

物质的性质,没办法!
估计两种DNA的结果有差异,
建议看一下杨频教授的相关书籍和论文!
4楼2011-10-10 13:52:51
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rebecco1987

新虫 (初入文坛)

不知道 我想问问做过相关实验的人 呵呵 谢谢您 看别人的文献做出来的结果和我的不一样
5楼2011-10-10 18:49:53
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