应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 相同质粒，不同的单克隆有的不能表达？
51/1返回列表
查看: 1558  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yuluoqiutong

木虫 (正式写手)

[交流] 相同质粒，不同的单克隆有的不能表达？

我的重组质粒一开始在DH5a,后来因为表达量较低，就挑单克隆提取质粒转到BL21里，涂板后长出一些单克隆，每次表达时就随机挑取上面的一个菌落进行摇菌扩大培养。但是有时纯化后一点点蛋白都没有得到，这是为什么呢？
还有一个问题是，相同的一个单克隆前一段时间蛋白表达量较高，过一段时间就降低了，这又是为什么呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-04-16 14:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaogang0301

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
表达量低或者不表达 和你的基因也有关系吧
赞一下 回复此楼
4楼2012-04-18 17:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yuluoqiutong: 金币+1 2012-04-27 16:21:43
工程菌一般容易出现这种老化的现象，所以一般采用保存质粒，每次表达新转化。
赞一下 回复此楼
2楼2012-04-16 15:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

迷失人鱼

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到同样的问题。学习了！谢谢！
赞一下 回复此楼
3楼2012-04-16 18:46:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
以前做葡萄糖苷酶遇到这样的情况，测序成功的质粒，电转化以后挑四个单克隆，2个有酶活，两个没有活性；将有酶活的一个转化子的质粒提出后继续电转化，挑了两个，又是一个有酶活一个没有活性。不知道为什么。
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-02 21:01:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭