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[交流]
相同质粒,不同的单克隆有的不能表达?
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我的重组质粒一开始在DH5a,后来因为表达量较低,就挑单克隆提取质粒转到BL21里,涂板后长出一些单克隆,每次表达时就随机挑取上面的一个菌落进行摇菌扩大培养。但是有时纯化后一点点蛋白都没有得到,这是为什么呢? 还有一个问题是,相同的一个单克隆前一段时间蛋白表达量较高,过一段时间就降低了,这又是为什么呢? |
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