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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 相同质粒，不同的单克隆有的不能表达？
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yuluoqiutong

木虫 (正式写手)

[交流] 相同质粒，不同的单克隆有的不能表达？

我的重组质粒一开始在DH5a,后来因为表达量较低，就挑单克隆提取质粒转到BL21里，涂板后长出一些单克隆，每次表达时就随机挑取上面的一个菌落进行摇菌扩大培养。但是有时纯化后一点点蛋白都没有得到，这是为什么呢？
还有一个问题是，相同的一个单克隆前一段时间蛋白表达量较高，过一段时间就降低了，这又是为什么呢？
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1楼 2012-04-16 14:23:20
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jqq1985

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
以前做葡萄糖苷酶遇到这样的情况，测序成功的质粒，电转化以后挑四个单克隆，2个有酶活，两个没有活性；将有酶活的一个转化子的质粒提出后继续电转化，挑了两个，又是一个有酶活一个没有活性。不知道为什么。
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5楼2012-05-02 21:01:24
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