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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 缓冲液pH对酶活有什么影响
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6041

铜虫 (小有名气)

[交流] 缓冲液pH对酶活有什么影响

测定CAT酶活，不同文献采用了不同pH的磷酸盐缓冲液，有7.0的，也有7.8的。请问不同pH对酶活有什么影响，另外，做不同的酶活测试，文献用了不同缓冲液，如测加单氧酶用了pH=8.0的Tris/HCl缓冲液，这个可以用林素三眼缓冲液代替吗？
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1楼 2012-04-15 15:22:35
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留小保

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
6041: 金币+1 2012-04-17 15:03:41
西瓜: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励交流！欢迎常来！ 2012-04-17 19:14:38
缓冲液的作用是为了给蛋白提供最适合的生活环境，只有蛋白在最适合环境中才有最高的活性，其中有缓冲液的成分如用的是tris还是HEPES，缓冲液的温度，缓冲液的pH值.不同的实验室环境不同纯出的蛋白活性也不同所以用的条件一般都有一些差别，所以一般都要对pH值拉一下梯度
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4楼2012-04-17 14:59:47
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流。 2012-04-15 18:41:03
6041: 金币+1 2012-04-15 20:57:57
ph当然对酶活有影响，
一般酶都有最适ph，其时酶活最高
更换缓冲体系有可能对酶活有影响，只是有可能，不一定
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2楼2012-04-15 16:56:07
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6041

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-04-15 16:56:07:
ph当然对酶活有影响，
一般酶都有最适ph，其时酶活最高
更换缓冲体系有可能对酶活有影响，只是有可能，不一定

谢谢回帖~
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3楼2012-04-15 21:24:46
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6041

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 留小保 at 2012-04-17 14:59:47:
缓冲液的作用是为了给蛋白提供最适合的生活环境，只有蛋白在最适合环境中才有最高的活性，其中有缓冲液的成分如用的是tris还是HEPES，缓冲液的温度，缓冲液的pH值.不同的实验室环境不同纯出的蛋白活性也不同所以用 ...

亲，你是做蛋白质的哟，再请教你一个问题哈！纯化和不纯化测出的酶活有什么区别？想测一种酶含量，但是纯化步骤太麻烦，要求差速离心三次，要用超高速离心机，我们实验条件达不到，所以就想不纯化了，10000rpm离心后直接取上清液测，但是这几次测，在预想的位置没有明显吸收峰……
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5楼2012-04-17 15:12:27
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