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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » HIC层析缓冲液pH对分离的影响
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lpw106

银虫 (小有名气)

[交流] HIC层析缓冲液pH对分离的影响 已有3人参与

我在一些资料上看到，HIC层析buffer对选择性和出峰时间有影响，我没做过pH的条件，请问有没有做过相关条件的大侠，我想确认一下。有详细的建议更好。
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1楼 2011-12-06 13:13:53
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落满夏天

银虫 (正式写手)
★
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你做的是纯化吗？PH会有一定影响，另外就是离子强度，PH可以设置一定的梯度筛选一下。个人觉得PH会影响带电。
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星星之火，可以燎原
2楼2011-12-06 15:02:24
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jacobgo

金虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
1楼: Originally posted by lpw106 at 2011-12-06 13:13:53:
我在一些资料上看到，HIC层析buffer对选择性和出峰时间有影响，我没做过pH的条件，请问有没有做过相关条件的大侠，我想确认一下。有详细的建议更好。

pH会影响到蛋白质的疏水性，一般情况而言，近蛋白等电点时，蛋白的疏水性强点，在HIC上保留会强点，从而对选择性和出峰时间都会有影响。
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路遥远，我们一起走
3楼2011-12-07 08:15:20
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sspxiaoji

银虫 (正式写手)
★
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主要是影响蛋白质本身的疏水性。但是疏水填料本身对PH没有什么要求，只要在工作PH范围内就可以了。
个人经验觉得PH对HIC的影响不大，其是通过高盐使蛋白疏水基团暴露，PH的影响不能说没有，但觉得不是主要影响因素。温度对HIC的柱行为倒是会有影响，可以关注一下。
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4楼2011-12-07 11:56:20
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