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hrjxx

新虫 (小有名气)

[求助] 有人知道150 mM phosphate buffer pH 7.5的缓冲液,是怎么配制的吗

我做双向,遇到说到这个缓冲液,但是没有见到这种说法的啊 ,有人知道是什么意思吗?怎么配制的呢》》?请指教啊
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 很好,很热心 2012-03-23 14:38:26
hrjxx: 金币+1, 谢谢啊,一般都是钠盐或者钾盐吧,我是做蛋白双向电泳,提蛋白用的 啊 2012-03-23 14:54:53
hrjxx: 金币+2, 呵呵,非常感谢啊,我还想,加Nacl与不加的区别呢?? 2012-03-26 01:02:38
嗯......
就是指磷酸盐缓冲液哦,具体用钙盐还是钠盐还两者综合起来,需要看你做什么了,如果是用于SDS-PAGE是不能用钙盐的,好像是因为钙会和SDS形成沉淀还是啥来.......我已经忘了,您最好问问师兄啊确定一下
希望有所帮助
Let God do with it as He wills
2楼2012-03-23 14:37:33
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

sorry 说错了 刚想起来,是用钾盐和钠盐,跑SDS-PAGE是不能用钾盐的,钾盐会和SDS沉淀的..........嘿嘿嘿
Let God do with it as He wills
3楼2012-03-23 16:14:59
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hrjxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-23 16:14:59:
sorry 说错了 刚想起来,是用钾盐和钠盐,跑SDS-PAGE是不能用钾盐的,钾盐会和SDS沉淀的..........嘿嘿嘿

呵呵,谢谢啊,不过我是知道具体的配比呢??百度也没找到呢
4楼2012-03-25 11:11:31
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

嗯.............
这样吧,给你个我配的方法:
50mM Na-Phosphate Buffer  
Solution A: 0.2M Sodium dihydrogen phosphate (27.8g/L use NaH2PO4.H2O)
Solution B: 0.2M Disodium hydrogen phosphate (71.7g/L use Na2HPO4.12H2O)
pH=7.5
16mL A+84mL B dilute to 400mL
注意:这里边我用的是0.2M原液A+B配0.05M缓冲液的,如果需要配成你的150mM就要用16mL A+84mL B 然后稀释成133.333mL的,说实话,这个我实在是头疼的去算了,按常理你应该用0.3M原液去配好后做一倍稀释的。
同样注意:因为蒸馏水自身有pH偏酸、偏碱可能(我们偏酸),所以16mL A + 84mL B的式子是需要微调的,但总体积是100mL的。
这里,我用的是Na盐,应该是能普遍应用的了,写英文的原因是偶一直自己写英文的实验流程,同时希望顺便记点单词.....
希望有所帮助
Let God do with it as He wills
5楼2012-03-25 15:26:36
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hrjxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-25 15:26:36:
嗯.............
这样吧,给你个我配的方法:
50mM Na-Phosphate Buffer  
Solution A: 0.2M Sodium dihydrogen phosphate (27.8g/L use NaH2PO4.H2O)
Solution B: 0.2M Disodium hydrogen phosphate (71.7g/ ...

谢谢啊,你说的很详细呢,只是为什么没有Nacl呢??有的pbs,加Nacl,请问你知道原因吗??
6楼2012-03-26 01:01:39
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

引用回帖:
6楼: Originally posted by hrjxx at 2012-03-26 01:01:39:
谢谢啊,你说的很详细呢,只是为什么没有Nacl呢??有的pbs,加Nacl,请问你知道原因吗??

嗯..................
你这么一说 我倒想起来了,我这个是用作植物生理用缓冲液的,不适合你用的
这里有个帖子,很适合你的情况,你可以看一下:
http://www.ptgcn.com/bbs/archiver/?tid-1105.html
里边解释的比较详细,实在不好意思,我把你的情况弄反了
Let God do with it as He wills
7楼2012-03-26 09:16:25
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zhang19242

铜虫 (初入文坛)

其实就是他说的时候没有把phosphate的配对离子写上吧。有些人用Na,有些人用K.我做蛋白质分离时用的是KHPO4 - Potassium Phosphate buffer, pH 7.2. 你就按你自己的需求陪Soidum phosphate or Potassium Phosphate 的就好了啊。
8楼2012-04-13 20:50:27
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2860996672

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

9楼2015-12-03 16:37:17
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