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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有人知道150 mM phosphate buffer pH 7.5的缓冲液，是怎么配制的吗
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hrjxx

新虫 (小有名气)

[求助] 有人知道150 mM phosphate buffer pH 7.5的缓冲液，是怎么配制的吗

我做双向，遇到说到这个缓冲液，但是没有见到这种说法的啊 ，有人知道是什么意思吗？怎么配制的呢》》？请指教啊
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1楼 2012-03-23 13:57:52
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 很好，很热心 2012-03-23 14:38:26
hrjxx: 金币+1, 谢谢啊，一般都是钠盐或者钾盐吧，我是做蛋白双向电泳，提蛋白用的 啊 2012-03-23 14:54:53
hrjxx: 金币+2, 呵呵，非常感谢啊，我还想，加Nacl与不加的区别呢？？ 2012-03-26 01:02:38
嗯......
就是指磷酸盐缓冲液哦，具体用钙盐还是钠盐还两者综合起来，需要看你做什么了，如果是用于SDS-PAGE是不能用钙盐的，好像是因为钙会和SDS形成沉淀还是啥来.......我已经忘了，您最好问问师兄啊确定一下
希望有所帮助
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Let God do with it as He wills
2楼2012-03-23 14:37:33
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
sorry 说错了 刚想起来，是用钾盐和钠盐，跑SDS-PAGE是不能用钾盐的，钾盐会和SDS沉淀的..........嘿嘿嘿
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Let God do with it as He wills
3楼2012-03-23 16:14:59
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hrjxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-23 16:14:59:
sorry 说错了 刚想起来，是用钾盐和钠盐，跑SDS-PAGE是不能用钾盐的，钾盐会和SDS沉淀的..........嘿嘿嘿

呵呵，谢谢啊，不过我是知道具体的配比呢？？百度也没找到呢
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4楼2012-03-25 11:11:31
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
嗯.............
这样吧，给你个我配的方法：
50mM Na-Phosphate Buffer  
Solution A: 0.2M Sodium dihydrogen phosphate (27.8g/L use NaH2PO4.H2O)
Solution B: 0.2M Disodium hydrogen phosphate (71.7g/L use Na2HPO4.12H2O)
pH=7.5
16mL A+84mL B dilute to 400mL
注意：这里边我用的是0.2M原液A+B配0.05M缓冲液的，如果需要配成你的150mM就要用16mL A+84mL B 然后稀释成133.333mL的，说实话，这个我实在是头疼的去算了，按常理你应该用0.3M原液去配好后做一倍稀释的。
同样注意：因为蒸馏水自身有pH偏酸、偏碱可能（我们偏酸），所以16mL A + 84mL B的式子是需要微调的，但总体积是100mL的。
这里，我用的是Na盐，应该是能普遍应用的了，写英文的原因是偶一直自己写英文的实验流程，同时希望顺便记点单词.....
希望有所帮助
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Let God do with it as He wills
5楼2012-03-25 15:26:36
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hrjxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-25 15:26:36:
嗯.............
这样吧，给你个我配的方法：
50mM Na-Phosphate Buffer  
Solution A: 0.2M Sodium dihydrogen phosphate (27.8g/L use NaH2PO4.H2O)
Solution B: 0.2M Disodium hydrogen phosphate (71.7g/ ...

谢谢啊，你说的很详细呢，只是为什么没有Nacl呢？？有的pbs，加Nacl，请问你知道原因吗？？
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6楼2012-03-26 01:01:39
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
引用回帖:
6楼: Originally posted by hrjxx at 2012-03-26 01:01:39:
谢谢啊，你说的很详细呢，只是为什么没有Nacl呢？？有的pbs，加Nacl，请问你知道原因吗？？

嗯..................
你这么一说 我倒想起来了，我这个是用作植物生理用缓冲液的，不适合你用的
这里有个帖子，很适合你的情况，你可以看一下：
http://www.ptgcn.com/bbs/archiver/?tid-1105.html
里边解释的比较详细，实在不好意思，我把你的情况弄反了
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Let God do with it as He wills
7楼2012-03-26 09:16:25
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zhang19242

铜虫 (初入文坛)
其实就是他说的时候没有把phosphate的配对离子写上吧。有些人用Na,有些人用K.我做蛋白质分离时用的是KHPO4 - Potassium Phosphate buffer, pH 7.2. 你就按你自己的需求陪Soidum phosphate or Potassium Phosphate 的就好了啊。
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8楼2012-04-13 20:50:27
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2860996672

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
9楼2015-12-03 16:37:17
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