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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我想浓缩质粒DNA，能用乙醇沉淀法吗？
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 我想浓缩质粒DNA，能用乙醇沉淀法吗？

我想浓缩质粒DNA，能用乙醇沉淀法吗？我看分子克隆书上说用聚乙二醇沉淀法。大家谁浓缩过质粒DNA呀？具体的步骤是啥？我想把大概100ul质粒浓缩为10ul-20ul。
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好孩子！
1楼 2012-04-14 21:42:18
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丰之第

铜虫 (正式写手)

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西瓜: 金币+1, Good！ 2012-04-17 10:14:08
zhang8826857: 金币+3, ★有帮助 2012-04-17 19:30:00
可以，不过还要用70%乙醇洗下。防止脱水。
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6楼2012-04-15 00:42:12
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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zhang8826857: 金币+4, ★有帮助 2012-04-17 19:29:53
用2.5*无水乙醇 0.1*3M NaAc沉淀质粒，离心去上清风用70%乙醇干再加10-20ul水就可以了
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hehe
9楼2012-04-15 20:07:36
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普通回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
浓缩没试过，提质粒倒是很多

你就当质粒再弄一边呗，相当于加完S III后边那一步，
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小木虫之有关部门负责人
2楼2012-04-14 21:47:06
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dilelton

金虫 (正式写手)

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zhang8826857: 金币+3, ★有帮助 2012-04-17 19:30:09
DNA的提取中浓缩用的是无水乙醇
应该也可以用于浓缩质粒DNA吧
lz试试！
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以诚感人者，人亦诚而应。
3楼2012-04-14 22:06:12
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

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zhang8826857: 金币+3, ★有帮助 2012-04-17 19:30:17
《分子克隆》上面碱裂解法提质粒那一部分有说到乙醇沉淀DNA，你参照那里的做就好啦。
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4楼2012-04-14 23:51:03
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chui2004

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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zhang8826857: 金币+3, ★有帮助 2012-04-17 19:30:26
可以用乙醇沉淀，不知道楼主要从100微升浓缩到10微升有何用呢？因为乙醇沉淀的话损失以相当大了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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相信自己，一定能成功！
5楼2012-04-15 00:38:20
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sunwei57

木虫 (小有名气)

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西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-04-17 10:12:29
zhang8826857: 金币+3, ★有帮助 2012-04-17 19:30:34
1/10体系的3M醋酸钠家2.5倍的无水乙醇-20半小时，离心、洗涤
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7楼2012-04-15 10:34:59
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wanmbhh

银虫 (小有名气)

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zhang8826857: 金币+3, ★有帮助 2012-04-17 19:30:54
如果溶剂是水的话，可以真空干燥啊 这样体积就直接下来了
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8楼2012-04-15 18:06:36
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diy患者

铁虫 (正式写手)

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西瓜: 金币+2, 鼓励交流！ 2012-04-17 10:13:21
zhang8826857: 金币+4, ★有帮助 2012-04-17 19:30:42
乙醇沉淀效率很高，至少90%以上，书上一般会让加一些溶液三，辅助沉淀，实际上，如果是用TE溶解的，我的经验，不加溶液三也可以。
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10楼2012-04-15 21:20:56
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