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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 我想浓缩质粒DNA,能用乙醇沉淀法吗?

我想浓缩质粒DNA,能用乙醇沉淀法吗?我看分子克隆书上说用聚乙二醇沉淀法。大家谁浓缩过质粒DNA呀?具体的步骤是啥?我想把大概100ul质粒浓缩为10ul-20ul。
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好孩子!
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丰之第

铜虫 (正式写手)

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西瓜: 金币+1, Good! 2012-04-17 10:14:08
zhang8826857: 金币+3, 有帮助 2012-04-17 19:30:00
可以,不过还要用70%乙醇洗下。防止脱水。
6楼2012-04-15 00:42:12
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

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西瓜: 金币+2, Good! 2012-04-17 10:13:10
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zhang8826857: 金币+4, 有帮助 2012-04-17 19:29:53
用2.5*无水乙醇 0.1*3M NaAc沉淀质粒,离心去上清风用70%乙醇干再加10-20ul水就可以了
hehe
9楼2012-04-15 20:07:36
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

浓缩没试过,提质粒倒是很多

你就当质粒再弄一边呗,相当于加完S III后边那一步,
小木虫之有关部门负责人
2楼2012-04-14 21:47:06
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dilelton

金虫 (正式写手)

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zhang8826857: 金币+3, 有帮助 2012-04-17 19:30:09
DNA的提取中浓缩用的是无水乙醇
应该也可以用于浓缩质粒DNA吧
lz试试!
以诚感人者,人亦诚而应。
3楼2012-04-14 22:06:12
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

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zhang8826857: 金币+3, 有帮助 2012-04-17 19:30:17
《分子克隆》上面碱裂解法提质粒那一部分有说到乙醇沉淀DNA,你参照那里的做就好啦。
4楼2012-04-14 23:51:03
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chui2004

铁杆木虫 (正式写手)

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zhang8826857: 金币+3, 有帮助 2012-04-17 19:30:26
可以用乙醇沉淀,不知道楼主要从100微升浓缩到10微升有何用呢?因为乙醇沉淀的话损失以相当大了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
相信自己,一定能成功!
5楼2012-04-15 00:38:20
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sunwei57

木虫 (小有名气)

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西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-04-17 10:12:29
zhang8826857: 金币+3, 有帮助 2012-04-17 19:30:34
1/10体系的3M醋酸钠家2.5倍的无水乙醇-20半小时,离心、洗涤
7楼2012-04-15 10:34:59
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wanmbhh

银虫 (小有名气)

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zhang8826857: 金币+3, 有帮助 2012-04-17 19:30:54
如果溶剂是水的话,可以真空干燥啊 这样体积就直接下来了
8楼2012-04-15 18:06:36
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diy患者

铁虫 (正式写手)

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西瓜: 金币+2, 鼓励交流! 2012-04-17 10:13:21
zhang8826857: 金币+4, 有帮助 2012-04-17 19:30:42
乙醇沉淀效率很高,至少90%以上,书上一般会让加一些溶液三,辅助沉淀,实际上,如果是用TE溶解的,我的经验,不加溶液三也可以。
10楼2012-04-15 21:20:56
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