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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我想浓缩质粒DNA，能用乙醇沉淀法吗？
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sarah_lz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, ★有帮助 2012-04-17 19:31:06
原来不是缓冲液的话真空干燥，再加20uL水重新溶
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11楼2012-04-16 12:09:18
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chibang1220

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, ★有帮助 2012-04-17 19:31:12
无水乙醇或者异丙醇都可以吧，试试
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人的差别在于业余时间
12楼2012-04-16 12:16:03
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beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 热心哈 2012-04-17 10:13:43
zhang8826857: 金币+5, ★★★很有帮助, 哥，能给俺下下来不？ 2012-04-17 19:33:28
http://cshprotocols.cshlp.org/content/2006/1/pdb.prot3907.short
提供你一个文献~不懂的再说啊
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13楼2012-04-17 00:14:08
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beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励应助 2012-04-17 19:29:12
zhang8826857: 金币+7, ★有帮助 2012-04-17 19:33:35
引用回帖:
13楼: Originally posted by beautybanana at 2012-04-17 00:14:08:
http://cshprotocols.cshlp.org/content/2006/1/pdb.prot3907.short
提供你一个文献~不懂的再说啊

如果有条件的话可以这么做：材料：PEG6000/PEG8000，NaCl.使得你要纯化或是浓缩的体系终浓度为：PEG8000：6%-8%（W/V，就是100mL水中有6gPEG）NaCl:0.5M大概就差不多，混匀静置10-20min，然后离心12000rpm 5-10min大概就可以了吧，具体的我没有研究，据我的推测应该是可以的，去掉上清，如果能看得见沉淀的话就好办了，75%的乙醇漂洗2次，然后加TE溶解就达到浓缩的目的了，一般会使用羧基磁性微球进行沉淀而不需要离心的，回收率会达到90%以上，你们大概没有这个条件，就用离心的方法吧，自己试试。
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14楼2012-04-17 18:16:20
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beautybanana

木虫 (著名写手)
不过要是我自己纯化回收的话20-30min就能搞定了，呵呵~
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15楼2012-04-17 18:18:44
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beautybanana

木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by beautybanana at 2012-04-17 00:14:08:
http://cshprotocols.cshlp.org/content/2006/1/pdb.prot3907.short
提供你一个文献~不懂的再说啊

把网页上的直接打印下来就可以了，不过你还是可以按照我后面告诉你的用PEG8000/NaCl来做，试试看
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16楼2012-04-17 23:15:30
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beautybanana

木虫 (著名写手)
把SPRI方法的改为离心即可
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  • 附件 1 : DNA purification and isolation using a solid-phase.pdf
    • 2012-04-17 23:17:01, 511.25 K
17楼2012-04-17 23:17:53
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li123h

铜虫 (初入文坛)
真空干燥泵，哈哈，很方便
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18楼2014-05-31 15:05:54
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letitiadan

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by sarah_lz at 2012-04-16 12:09:18
原来不是缓冲液的话真空干燥，再加20uL水重新溶

请问，真空干燥一般要多长时间？
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19楼2016-01-25 21:14:13
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)
最近我们课题组做实验，有用过一款叫biog的游离DNA浓缩的试剂盒，效果还挺好的，浓缩之后获取的纯度还是挺高的。
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20楼2018-11-29 16:37:38
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