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带GST标签的融合蛋白的纯化问题——急急急
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cafe大西瓜
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虫号: 1730519
注册: 2012-04-01
专业: 细胞信号转导
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求助
]
带GST标签的融合蛋白的纯化问题——急急急
已有1人参与
请教各位高人们:我表达了一个带GST标签的融合蛋白,原核表达在上清中,可用GST纯化柱进行纯化时,就是结合不上去,蛋白全部都跑到第一流出液中去了,高人们给分析一下是什么原因呢,在此先谢谢各位了,期待大家的回复哦。。。。。。。。
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1楼
2012-04-14 10:41:50
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张晓彩
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虫号: 3296261
注册: 2014-06-28
专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
我现在也在纯化蛋白 开始也是挂不到柱子上 是不是你的超声条件太过剧烈了啊 一定要水浴超声 并且超声完管壁不能发热 也不能发泡 否则GSH失活 无法结合到柱子上
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5楼
2014-07-12 17:03:26
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