| 查看: 2822 | 回复: 7 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
载体总是连不上，已经一个月了~真心求助，详细在帖子里
|
|||
|
我用的是Petduet的载体，选用的是bamHI和Xhol的酶切位点，载体双酶切过，用以前的酶切产物链接并做了菌液PCR-MIx鉴定，是连上的，说明载体是挺好用的。 我需要连接一个1500bp的目的片段，也是B/X的酶切位点，可是试了很多次，菌液PCR几乎都没有阳性的克隆。平板上长的克隆也比较少，一般就三四个。 酶切体系40ul PCR产物 20ul 10 X H 4ul BamhI 1.5ul XholI 1.5ul ddH2O 13ul 酶切6~8小时，连接体系8ul，按照TAKARA 的 Solution I 说明书来连。 1个月了，还是没有构建成功。求助！很着急！  PetDuet-1 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有278人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助哪位大侠给分析下涂料分层的问题
已经有25人回复
- 求助！！！关于zeta potential！强帖高奖励啦~~~
已经有6人回复
- 求助一个合成反应（难度大概在空间位阻）
已经有19人回复
- 求助PP塑料应力发白
已经有12人回复
- 2013考研求助
已经有10人回复
- 求助 高通量测序
已经有3人回复
- PVA总是溶解不好，求助
已经有20人回复
- 求助一段德文翻译【有效期截止到3月22日】
已经有2人回复
- [求助]，U盘和内存卡退出时总是显示该设备正在使用。怎么办？
已经有5人回复
- 载体连接pcr片段一直连不上
已经有17人回复
- PCR产物与T载体连不上 求助
已经有29人回复
- 我用的是pMAL-m2载体，片段大小连不上！
已经有3人回复
- 【求助/交流】为什么我的PCR产物总是连接不上T载体
已经有26人回复
- 【求助/交流】连接总是连不上，如何解决
已经有10人回复
- 【求助/交流】PEGFP-N1与目的条带连不上
已经有6人回复
- 【求助】观看PPS或者用迅雷下载，不久宽带连接就会自动断开，之后就再连不上了
已经有4人回复
青菜小虫
银虫 (著名写手)
风居住的街道
- MolEPI: 5
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1666.5
- 散金: 1249
- 红花: 29
- 帖子: 1111
- 在线: 352.2小时
- 虫号: 1332002
- 注册: 2011-06-27
- 性别: MM
- 专业: 病毒学
3楼2012-04-13 21:48:14