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lxe2008

银虫 (小有名气)

[求助] 请做过DNA的高手进来看看

请问5um的DNA溶液，反复冻容的话，能存放多久，冷藏是在-18度，请问多久需要换DNA溶液？
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1楼 2012-04-09 10:13:35
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丑牛1973

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我的50mM的DNA，如果反复冻融，半年就不能用于PCR扩增
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2楼2012-04-09 11:35:56
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lxe2008

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 丑牛1973 at 2012-04-09 11:35:56:
我的50mM的DNA，如果反复冻融，半年就不能用于PCR扩增

那是不是浓度越低，DNA就越容易变质呢？我不懂这方面的，可实验中要用到DNA。不知道您是不是电化学方面的？
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3楼2012-04-09 19:13:23
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励 2012-04-10 09:24:11
你的这个单位是不是浓度uM啊，这个浓度倒是不低了，但是总是反复冻融的话还是不好的，你可以分装一下，然后每次用每次解冻一支，或者没用完的放4度，但是还是尽快用的好，这样的话4度还是能用一周多的
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4楼2012-04-09 20:00:57
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cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-10 09:24:28
你的这个浓度挺高的，但有时候浓度高不一定保存效果好，DNA还是相当稳定的，之所以存储一段时间后不能用是因为DNA末端自然降解了（自然降解是一个可逆过程），大多时候你扩增的DNA末端是单链的（酶的性质），所以你可以分开保存，或者过几天就以此为模版再扩一次，这个不麻烦。好运
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我努力我奋斗我成功
5楼2012-04-09 22:00:00
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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
5uM弄的还好，我一般分装为2uM，解冻后4摄氏度冷藏，半个月之内用完，没有发现有什么问题。我么组在做实验是能接受的反复解冻次数是三次，再多了不好说了。我认为以上经验你可以借鉴。另外，分装的时候还是根据自己的使用情况控制好体积，避免体积过大短时间内用不完又不敢长期使用而造成的浪费，毕竟离心管不如dna和自己的实验值钱啊。
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6楼2012-04-10 10:52:20
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lxe2008

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shixiaba at 2012-04-10 10:52:20:
5uM弄的还好，我一般分装为2uM，解冻后4摄氏度冷藏，半个月之内用完，没有发现有什么问题。我么组在做实验是能接受的反复解冻次数是三次，再多了不好说了。我认为以上经验你可以借鉴。另外，分装的时候还是根据自 ...

谢谢，你的回复对我很有帮助
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7楼2012-04-11 17:23:27
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lxe2008

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shixiaba at 2012-04-10 10:52:20:
5uM弄的还好，我一般分装为2uM，解冻后4摄氏度冷藏，半个月之内用完，没有发现有什么问题。我么组在做实验是能接受的反复解冻次数是三次，再多了不好说了。我认为以上经验你可以借鉴。另外，分装的时候还是根据自 ...

弱弱的问一下你是什么专业，具体做什么方向的？
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8楼2012-04-11 17:23:58
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lxe2008

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-04-09 20:00:57:
你的这个单位是不是浓度uM啊，这个浓度倒是不低了，但是总是反复冻融的话还是不好的，你可以分装一下，然后每次用每次解冻一支，或者没用完的放4度，但是还是尽快用的好，这样的话4度还是能用一周多的

谢谢回复
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9楼2012-04-11 17:25:20
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