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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lxe2008

银虫 (小有名气)

[求助] 请做过DNA的高手进来看看

请问5um的DNA溶液,反复冻容的话,能存放多久,冷藏是在-18度,请问多久需要换DNA溶液?
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丑牛1973

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我的50mM的DNA,如果反复冻融,半年就不能用于PCR扩增
2楼2012-04-09 11:35:56
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lxe2008

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 丑牛1973 at 2012-04-09 11:35:56:
我的50mM的DNA,如果反复冻融,半年就不能用于PCR扩增

那是不是浓度越低,DNA就越容易变质呢?我不懂这方面的,可实验中要用到DNA。不知道您是不是电化学方面的?
3楼2012-04-09 19:13:23
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励 2012-04-10 09:24:11
你的这个单位是不是浓度uM啊,这个浓度倒是不低了,但是总是反复冻融的话还是不好的,你可以分装一下,然后每次用每次解冻一支,或者没用完的放4度,但是还是尽快用的好,这样的话4度还是能用一周多的
4楼2012-04-09 20:00:57
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cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-10 09:24:28
你的这个浓度挺高的,但有时候浓度高不一定保存效果好,DNA还是相当稳定的,之所以存储一段时间后不能用是因为DNA末端自然降解了(自然降解是一个可逆过程),大多时候你扩增的DNA末端是单链的(酶的性质),所以你可以分开保存,或者过几天就以此为模版再扩一次,这个不麻烦。好运
我努力我奋斗我成功
5楼2012-04-09 22:00:00
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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
5uM弄的还好,我一般分装为2uM,解冻后4摄氏度冷藏,半个月之内用完,没有发现有什么问题。我么组在做实验是能接受的反复解冻次数是三次,再多了不好说了。我认为以上经验你可以借鉴。另外,分装的时候还是根据自己的使用情况控制好体积,避免体积过大短时间内用不完又不敢长期使用而造成的浪费,毕竟离心管不如dna和自己的实验值钱啊。
6楼2012-04-10 10:52:20
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lxe2008

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by shixiaba at 2012-04-10 10:52:20:
5uM弄的还好,我一般分装为2uM,解冻后4摄氏度冷藏,半个月之内用完,没有发现有什么问题。我么组在做实验是能接受的反复解冻次数是三次,再多了不好说了。我认为以上经验你可以借鉴。另外,分装的时候还是根据自 ...

谢谢,你的回复对我很有帮助
7楼2012-04-11 17:23:27
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lxe2008

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by shixiaba at 2012-04-10 10:52:20:
5uM弄的还好,我一般分装为2uM,解冻后4摄氏度冷藏,半个月之内用完,没有发现有什么问题。我么组在做实验是能接受的反复解冻次数是三次,再多了不好说了。我认为以上经验你可以借鉴。另外,分装的时候还是根据自 ...

弱弱的问一下你是什么专业,具体做什么方向的?
8楼2012-04-11 17:23:58
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lxe2008

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-04-09 20:00:57:
你的这个单位是不是浓度uM啊,这个浓度倒是不低了,但是总是反复冻融的话还是不好的,你可以分装一下,然后每次用每次解冻一支,或者没用完的放4度,但是还是尽快用的好,这样的话4度还是能用一周多的

谢谢回复
9楼2012-04-11 17:25:20
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