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mch502

金虫 (小有名气)

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[求助] SDS-PAGE蛋白质电泳，电泳迁移率只与分子量相关吗？

请问各位，SDS-PAGE蛋白质电泳中电泳迁移率只与分子量相关吗？
我的试验中对牛血清白蛋白（BSA）进行改性，用乙二胺与BSA上面的羧基(-COOH)反应，让BSA只带有氨基(-NH2)，同时BSA的分子量会增大。已经用化学法测得改性后的BSA游离氨基数目，最近做SDS-PAGE鉴定蛋白质时，不止一次发现分子量大的改造后的BSA条带反倒是比原始BSA向前迁移的距离多，Maker显示分子量还比未改造的BSA低。本实验室的另一同学也得出相同的相反结果。请问，这一现象怎么解释啊？

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1楼2012-04-08 22:34:42

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DA_huyang

新虫 (初入文坛)

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专业: 免疫生物学

PAGE原理：
据有无浓缩效应可将电泳分为两类：

  连续系统：缓冲液pH值、凝胶浓度相同，带电粒子靠电荷及分子筛效应区分。
  不连续系统：缓冲离子成分、 pH值、凝胶浓度不同，带电粒子在电场中由电荷效应、分子筛效应、浓缩效应区分。

而我们常用的有分离胶和浓缩胶组成，应该是指不连续系统  这样主要靠电荷效应分子筛效应和浓缩效应来区分