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请问如何提高蛋白在酵母菌上清中的表达呢？
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
ttthx: 金币+10, ★有帮助 2012-04-10 08:24:41
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请问如何提高蛋白在酵母菌上清中的表达呢？ ------------------------------------------------------------ 首先，你这个问题问错了。蛋白没有办法在酵母上清中表达。 你是不是想问：如何提高酵母上清中蛋白的含量？ 或是 如何提高酵母内某些蛋白的表达？ 或是 如何提高酵母中蛋白的提取效率？ 如果是第一个和第三个问题的话 涉及到蛋白质的提取。酵母的话我们一般破壁是用酶降解破壁，然后离心去杂质，然后降解。这个过程中，一方面是在破壁时，酶解时间要充分，而且加入酶的量要合适。这个要根据实际情况摸索。沉降蛋白一般没有什么难度。 如果是第二个问题。那么，我就要问你：你是要异源性表达蛋白，还是自身表达的蛋白？ 如果是异源性，那么在载体构建时，选一个高效启动子载体，诱导表达即可；如果是第二个，那么，用营养素诱导即可。 这两个难度不大。 |
2楼2012-04-08 23:35:37
3楼2012-04-09 08:23:44