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ttthx

金虫 (小有名气)

[求助] 请问如何提高蛋白在酵母菌上清中的表达呢?

请问如何提高蛋白在酵母菌上清中的表达呢?
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molecula

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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ttthx: 金币+10, 有帮助 2012-04-10 08:24:41
请问如何提高蛋白在酵母菌上清中的表达呢?
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首先,你这个问题问错了。蛋白没有办法在酵母上清中表达。
你是不是想问:如何提高酵母上清中蛋白的含量?
或是 如何提高酵母内某些蛋白的表达?
或是 如何提高酵母中蛋白的提取效率?
如果是第一个和第三个问题的话   涉及到蛋白质的提取。酵母的话我们一般破壁是用酶降解破壁,然后离心去杂质,然后降解。这个过程中,一方面是在破壁时,酶解时间要充分,而且加入酶的量要合适。这个要根据实际情况摸索。沉降蛋白一般没有什么难度。
如果是第二个问题。那么,我就要问你:你是要异源性表达蛋白,还是自身表达的蛋白?
如果是异源性,那么在载体构建时,选一个高效启动子载体,诱导表达即可;如果是第二个,那么,用营养素诱导即可。
这两个难度不大。
2楼2012-04-08 23:35:37
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ttthx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by molecula at 2012-04-08 23:35:37:
请问如何提高蛋白在酵母菌上清中的表达呢?
------------------------------------------------------------
首先,你这个问题问错了。蛋白没有办法在酵母上清中表达。
你是不是想问:如何提高酵母上清中蛋白的 ...

嗯,谢谢,那我想问的是第一个。我破壁的时候用的是超声破碎,没有加酶啊。
好久不见
3楼2012-04-09 08:23:44
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