应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 利用CODEHOP和iCODEHOP 设计简 并引物
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
1301/3返回列表123下一页
查看: 7355  |  回复: 129
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【奖励】 本帖被评价115次，作者shizishanshang增加金币 90 个

shizishanshang

至尊木虫 (职业作家)

[资源] 利用CODEHOP和iCODEHOP 设计简 并引物

前面给人设计了几对简并引物，说以后给大家上传一个方法的文章。但是原帖子不能上传附件，所以就重新开一贴，放到这里来算了。
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 利用CODEHOP和iCODEHOP 设计简.pdf
    • 2012-04-06 11:09:08, 249.94 K

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子技术专辑 普通PCR资料集合 蛋白表达纯化鉴定精华 蛋白方面

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

快乐的小麻雀

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-04-06 11:09:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有7个 )

skjtg

金虫 (初入文坛)
请高手帮看看这条蛋白序列的简并引物。
>gi|376316684|emb|CCG00069.1| Cysteine sulfinic acid decarboxylase [uncultured Flavobacteriia bacterium]
MSYALKHTKQRKHTNREAHMILNDLNQPIIESTELDEFFEALCAANYENYEGLIKAHNINFETLLPFASW
SSKSYQRICLASNEECELILLCWDKGQKTPIHSHDGQKCWVYFAKGEFEEFLYAKGEKNNLLQKNSVAEG
QVTFLTDEIGFHSLENKSSGLGMTLHLYANPITKCQVYSESKKEFENKELQYDIDLSDSNRDTEMSADLL
TFIQLSQELLKDENDNPVSQRIPSSELKKVLNIGLEENGINEDQFVETLKKIVLATPKTSSSLFFNQLFG
GRESKAVLGDLLAVMLNNSMYTYKVGGVQVGIEKEIINQVIDRLDYGPHAGGTFPSGGSMSNFMAILMAR
DKVNEVSRQTGLKINMIAYTSAESHYSIEKNAAFIGIGRENVRKIPVNEVGEMRVDSLKAAIDKDLEAGN
TPFFVNATAGTTVLGAFDPIKELGEVCRAYNIWMHVDGAYKGSVLLSEKYKHLLEGSNQADSFSFNPHKM
LGAPLTCSVIVVKDKKHLHDSFSNNAEYLYQTDEDDFNLGKTSFQCGRRNDALKLWTLWKSKGRKGLERI
VDKQFELADYAREYVRNHPDYELYSFDDSIAICFNYKNISADQLCTDLYEHDELMVGYGKFRENEFVRMV
TINHANTKEDIEHFFKVIEAFYTR
下面是我自己用PRIMER5.0做的引物，感觉简并度很高
上游引物：TYAAYCARYTNTTYGGNGG  
下游引物：：RTCRTTNCKNCKNCCRCA
赞一下 回复此楼
18楼2012-06-10 00:02:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shizishanshang

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
18楼: Originally posted by skjtg at 2012-06-10 00:02:21
请高手帮看看这条蛋白序列的简并引物。
>gi|376316684|emb|CCG00069.1| Cysteine sulfinic acid decarboxylase
MSYALKHTKQRKHTNREAHMILNDLNQPIIESTELDEFFEALCAANYENYEGLIKAHNINFETLLPFASW
SSKSYQRICLASNEECE ...

你这就一个蛋白的序列，没有办法做简并引物啊
赞一下 回复此楼
19楼2012-06-10 15:51:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skjtg

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by shizishanshang at 2012-06-10 15:51:01
你这就一个蛋白的序列，没有办法做简并引物啊...

>gi|376316684|emb|CCG00069.1| Cysteine sulfinic acid decarboxylase [uncultured Flavobacteriia bacterium]
MSYALKHTKQRKHTNREAHMILNDLNQPIIESTELDEFFEALCAANYENYEGLIKAHNINFETLLPFASW
SSKSYQRICLASNEECELILLCWDKGQKTPIHSHDGQKCWVYFAKGEFEEFLYAKGEKNNLLQKNSVAEG
QVTFLTDEIGFHSLENKSSGLGMTLHLYANPITKCQVYSESKKEFENKELQYDIDLSDSNRDTEMSADLL
TFIQLSQELLKDENDNPVSQRIPSSELKKVLNIGLEENGINEDQFVETLKKIVLATPKTSSSLFFNQLFG
GRESKAVLGDLLAVMLNNSMYTYKVGGVQVGIEKEIINQVIDRLDYGPHAGGTFPSGGSMSNFMAILMAR
DKVNEVSRQTGLKINMIAYTSAESHYSIEKNAAFIGIGRENVRKIPVNEVGEMRVDSLKAAIDKDLEAGN
TPFFVNATAGTTVLGAFDPIKELGEVCRAYNIWMHVDGAYKGSVLLSEKYKHLLEGSNQADSFSFNPHKM
LGAPLTCSVIVVKDKKHLHDSFSNNAEYLYQTDEDDFNLGKTSFQCGRRNDALKLWTLWKSKGRKGLERI
VDKQFELADYAREYVRNHPDYELYSFDDSIAICFNYKNISADQLCTDLYEHDELMVGYGKFRENEFVRMV
TINHANTKEDIEHFFKVIEAFYTR

>gi|88803186|ref|ZP_01118712.1| hypothetical protein PI23P_11377 [Polaribacter irgensii 23-P]
MSNITKDLAMFNELVEVLITEEGIHPVAERIEANKLYDVLDLSLNAEEMVDAEFKEVLRDVLVSTPKTAT
NLFFNQLFGGRQSKAVLGDLLAVLLNNSMYTYKVAGPQVGIEQEIIRQSCHLIGYGAASNGTFPTGGSMS
NYMALVMGRDAKDPECRLDGMTKPLIVYTSKEAHYSNDKNVSFAGIGRNNMRYIATDAEGRMLPRLLEAQ
IIEDMKNGGIPTYVNATAGTTVLGAFDPIDAIADITEKYEMWLHVDGAYCGSVIFSDQYKHLVSGVSRSN
SFSYNAHKMLGTPLTCSILLVNDKKHLHDSFSNDADYLYQTDGDDFNLGKTSFQCGRRNDALKFWTLWKS
IGTSGLKNIVDQQFSLADIALDYIRSHSEYTLYSFNDSISVCFNYKDIEPMALCTALYEQQITVVGFGSF
EEDTFVRLVTINANNEKVDILNFFHVLEAFVVKTPNLPKVLALQA

>gi|91214784|ref|ZP_01251757.1| diaminobutyrate-2-oxoglutarate transaminase [Psychroflexus torquis ATCC 700755]
MQADLKVFQKISQKLIDYEQKEGVTKPIEANQLFETLDLDLDEEGLDEEKFESLLEDVVLSTPRTSTKLF
FNQLFGGRSHKGTLGELLAVMLNNSMYTYKVGGPQVGIEKAIIDKVCKMLNFGKNADGTFPPGGSMSNFM
AMLMGRDAYNRDIKLEGVSEKMIIYTSDTSHYSITKNAMFGGIGISQIRKIETDKFGKMKPLALQNQIEE
DMKHGFQPFFVNATAGTTVLGAFDDIEAIHHITKNYKNLWLHVDGAYCGSVIFSEKYKHLVDGVEHADSF
SFNAHKMLNVPLSCSILITKEKHNLKHSFACDADYLYQTDGDEYNLGKTSLQCGRRNDALKFWTLWKSVG
TKGLEQMVNQQFDLAETARTYIENHSDYKLYSYEDSISVCFNYKNIDPKDLCNSLYQDGKLMVGYGEFDG
ETFVRLVTINSTNRDKDILNFFKVMETYVAEKHEDLVTL

>gi|163787564|ref|ZP_02182011.1| Pyridoxal-dependent decarboxylase [Flavobacteriales bacterium ALC-1]
MQKDINIFIELVEQLLLEEKSQPVAKPIPTSDLYNQLDLSLNENGLIDDDLKNILKDIIKSTPKTASKSF
FNQLFGGRIGKAALGDLLAVMFNNSMYTYKVAGPHVGIEKQVIHNICELAGYSKNSDGTLAPGGSMSNMM
ALTMARDYKNGSIRTHGLNRLMTLYTSKESHYSISKNAALTGIGRNQVRHVNTNNKGELLAEHLGELVQK
DINDGYEPFFVNATAGTTVLGAFDDIEAISKVCKKHKLWLHVDGAYCGGVIFSKTYKQLIKGLELSDSFS
VNAHKMLGTPLSCSIIVTQHKAQLHHSFSNEADYLYQTDSDDFNLGKTSLQCGRRNDALKLWTLWKSIGT
NGLEKIVDKQFEMADIARTYINNHKDYTLHSFDDSISICFSYKDIAAKEICTALYENSKLMVGFGKFNNQ
EFVRMVTINSVLEKEDILAFFETLESYVSSTLLNISAS
赞一下 回复此楼
20楼2012-06-10 23:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shizishanshang

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
20楼: Originally posted by skjtg at 2012-06-10 23:35:32
>gi|376316684|emb|CCG00069.1| Cysteine sulfinic acid decarboxylase
MSYALKHTKQRKHTNREAHMILNDLNQPIIESTELDEFFEALCAANYENYEGLIKAHNINFETLLPFASW
SSKSYQRICLASNEECELILLCWDKGQKTPIHSHDGQKCWVYFAKGEFEEFLYA ...

上游引物1：GCAGTTATGTTTAATAATTCCATGtayacntayaa
配对下游引物1，2，3分别为：
CCACAGTGTCCAAAATTTCARNGCRTCRTT

TTCAGTGCATCATTTCGTCKNCCRCAYTG

ACTGTTGTGCCTGCTGTNGCRTTNAC

片段长度分别为：775，759，423 bp.

上游引物2：
AGGCACAACAGTTCTGggngcnttyga

与上面的下游引物1，2配对，长度分别为365，349 bp.

94度30妙秒，54退火1min, 72度延伸1min, 40个循环。 注意简并引物要比非简并引物多加些，一般要加倍。

做出来做不出来都给我说一声。

[ Last edited by shizishanshang on 2012-6-12 at 21:03 ]
赞一下(1人) 回复此楼
21楼2012-06-12 20:59:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amethyst967

木虫 (正式写手)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

要学习简并引物设计～
赞一下 回复此楼
28楼2012-08-10 13:47:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hraikeyan

金虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

http://www.kazusa.or.jp/codon/cg ... robacterium&c=s是我所要从中克隆的菌种的密码子偏好性表。
现在已知A，B有已报道该酶活力，C,D,E••••••是我要克隆的菌同源性高的几种菌。能否花费您时间帮我看看，我设计的引物怎么样？个人感觉GC含量太高，TM值太大。但是这种酶本身的GC含量就是很高。我最后用touch-down条件没有P出东西，大侠看见您给一些虫友设计的引物都很好，所以特在这请教您。拜托了~
Up-1:CGCCGGCGTCCCnatgatgaayg
Up-2:CGGCAAGGCCGTCtgygargayyt
Up-3:CCATCGGCGGCGAYCARGGNGG
down-1:GGGAAGGCGCCGgtrtasggsac
down-2:GGCACGGTGATGgcsggrtgncc

>A:
1 mgiklptled lreiskqfnl dledeelksf lqllklqles yerldslpdy tprvkyqrtl
       61 grppmkeenp ygalvwitsi kgkeegklkg kricikdnvm iagipmlngs kmlegfvphm
      121 datvvsrild eageivaktt cedlcfsggs htsypwpvln prnpeymagg sssgsavava
      181 sgycdmavgg dqggsirips swvgiyglkp thglvpytga fsieptldhl gpmantvkdv
      241 allleviagr deldsrqpds lppppvkpys klidgdvkdm kvgivkegfn wsnsekdvde
      301 lvldsakkle dygikvedts iplhrmgldi wtpiaiegat atmilgsgvg wgrkglfetq
      361 iadffgnslk srardlpntv kgvlmlgylm ikmynnryya karnlsivlk eaydsalrky
      421 dalimpttpm kamryksepg fdeyfimalg minntapfdv tghpamnipv gysnglpvgl
      481 miigrhfeed kvlklanvfe rikk
>B:
1 mtvvlptpaq lldvakqcgl sltdadvasf rglmqgsida ynlvgampde lpevkyprtp
       61 gyrpspeenp rnawyrkstv kgaasgklkg ktvalkdnim lagvpmmngs atlegyvpdf
      121 dativtrmld agaeiagkvh cesfcmsggs htgavgavhn phkmgysagg sssgsgvvva
      181 lgevdmaigg dqggsirmps sfcgtygmkp twglvpytgi mpieifvdht gpmtatvadn
      241 alllevlagd dgydprikap kveeytkalg qgvkgmkigi lkegfeqpta eaavnesvre
      301 aakrfkdlga tvetvsipmh mvgpaiwtpi gtegmtqtmm ygdgyglsrs dlystslmdf
      361 hrgwrrqads lsettklfll lgtyinnsfg pryygkalni srrltaaydk afgeydllll
      421 pttpmkatkl peptasredy varalemian tapfdithhp aislpcgmvd glpvglmlvg
      481 rmfeestiyr aahafeqigd wkkm
>C:
1 msiqppdlaa fakaavdgel gikesdlaay haaaegllgs wrtveelyse iapiapkrsw
       61 srpaagdngl gawsvqtqlq evssgplagr tvvikdnvsv agvpmmngsr tlegfvpsed
      121 atvvtrllga gativgkavc edlcfsggsh tskpgpvrnp wnhahasggs ssgsgalvaa
      181 gevdmaiggd qggsiripaa fcgvvghkpt hglvpytggf pieqsidhlg pitrtvtdaa
      241 lmlsviagrd ekdprqpdri dpvdyvaalg esakglrvgv vtegfgrens epevddtvrs
      301 avetlrsvgl qaadvsipwh lyggalwdvl ategglsqmi dgnaygmnwk ghydpqliey
      361 ygrkwrsdps mfsetvklvi lagrhalatq hgrhyamarn laprlaaayd daldqydvlv
      421 mptlttrapv laapdgpvee tfsrafemlp qtspfditgh pactvpagla gglpvglmii
      481 gkrfhdatvl rvahafenav ggfplpiqer ska
>D:
1 mavpppdqka laaaaarygl slspadldsf qpfvhgllas wdaveelysa tapavpqrsw
       61 qrpddadnpy nawyvtteir gaadgplagr tvaikdntav agvpmmngsk tvegfvprrd
      121 ativtrllaa gatiagkavc edlcfsggsh tsrtgpvrnp wdetrsaggs ssgsaalvas
      181 gvvdlatggd qggsvripaa ysgivghkpt hglvpytgaf pieqtidhlg pmtrtvadaa
      241 lvldviagpd gldprqpagl vtddysgala rsaaglrvgv vsegfghans dpgvdatvra
      301 avdilreagl daedvsvpwh lhgariwdvi ategaaaqmv eangygmnwq geydpeliah
      361 ygrqwrarpd efsetvkfvl laggyglase hgrhyamarn lavdlrrayd ealqrydvlv
      421 mptlpmtast ipgpdapree iitralemig ntcvtdvtgh patsvpagls gglpvgmmii
      481 grmfedatpl rvahtfeqav ggfpaptaat tgsqa
>E:
1 mpvrppdene vaalaasygm kptaeevaay tpivaaflts ydaveelyag iapqapddrp
       61 strpaeadnp lgawyvttei rgaaegplag rtvavkdnve vagvpmmngs htvegfvpre
      121 datvvtrlle agatitgksv cedlcfsggs htsvtgpvrn pwdpsrttgg sssgsaalva
      181 sgevdlavgg dqggsirmpa afsgivghkp thglvpytga fpieltldhl gpmtrtvada
      241 aamldvlagr dgddprqpad vvpeqyaaal dgdvaglrvg vvaqgfgwee lsedgvddtv
      301 raaaerlrel gievvdvdlp whrhalhvwn viatdgatvq mvegngygwn yegrydpeli
      361 ahygrqrrev vdrwsptvta valtgrwsle reqtrhyama qnlatevrrq ydaaladvdl
      421 lvmptvpmva peipapddpv etrvaralem ivncapfdvs ghpatsvpag lsqglpvgmm
      481 lvgrrfedtt plkvahafeq lvggfprppa r
>F:
  1 mairrpdtqd vaalaesygm hpgedavaty talidgslvs ydaveelyaa iapqapagrs
       61 gqrpdddanp lgawyvrtei tgapdgplag rtvavkdnta vagvpmmngs htlegfvptr
      121 datvvsrlla agatitgksv cedlcfsggs htsvtgpvrn pwdrsrttgg sssgsgalva
      181 agevdlglgg dqggsirmpa afcgvvghkp tfglvpytga fpieltidhl gpitrtvada
      241 alaldvlagr dgldprqpad lapeqyaaal ggdvaglrvg vvtqgfgweg lsepgvdetv
      301 raaaarlgel gievvevdlp whrhalhvwn viatdgaavq mvegngyghn wdgfydpeli
      361 ahygrqsrav adrwsptvtl valagrwsaq qeqtrhyama rdlvvevraq ydraladvdl
      421 llmptvpmva plipaaddpl evqvaralem ivntapfdvs ghpatsvpag lsdglpvgmm
      481 lvgrrfedtt clkvahafeq ivggfpappt a
>G:
1 msvqrpdaea igvaaehfgl hldapareef vglvdgalgs ydvveelyaa svapvtpare
       61 yvaeldgksn plgawyvtts vtadapsdtr lagrrvaikd nvalagvpmm ngsrtlegft
      121 psrdatvvsr lldagaeiag kavcedlcfs gssftpasgp vrnpwdlsre aggssggsaa
      181 lvangdvdla iggdqggsir ipasfcgvvg hkptfglvpy tgafpierti dhvgpiartv
      241 adaalmlsvi agydgrdprq pesvsaadyl sslgdgvegm rigvvaegfg heasqaavdd
      301 tvqtaaqrft eagavveqvs iqwhrdafhv wnviatdgga yqmldgngyg lnagglydpe
      361 qmeyfaehri ahadalsetv klvalcghhg vtalggssyg karnlvplar aaydaalqty
      421 dvlvmptlpy vaselpdpsi dratyltkal gmiantapld vtghpalsvp aglvdglpvg
      481 mmiigkhhdd atvlrvgqty ehltggfptp ssqragtmgs qfapa
>H:
1 mtvirpndda igsaanrygl hldaatrqef aglvdgalgs ydvvddlyad esfsapsrdh
       61 atpdasdnpl gawyvttsis tatggpltgr rvaikdnvtv agvpmmngsr slegfvptrd
      121 atvvtrllda gatvagkavc edlcfsgssf tpatgpvrnp wdpdreaggs sggsaalvaa
      181 gdvdfaiggd qggsiripaa fcgvvghkpt fglvpytgaf piertidhlg pitrtvedaa
      241 lllsviagrd ghdprqpdnl vvddyvstld tgtdglrvgv vsqgfghans qpevddavra
      301 aahrfteagg vvdevsipwh lhafhvwnvi atdggayqml dgngyglnad glydpelmay
      361 faqhriqhad alsetvklva lcghhgvtal ggssygkarn lvpraraayd aalenydvlv
      421 mptlpyvase lpaqdvdrvt yvtkalgmia ntapfdvtgh palsvpaglv nglpvgmmvi
      481 gkrfddatvl raghafeqir gafptasgqp atsarlsla
>I:
1 mpvqrptpeq lrrsaehygl hldadavesf salvdaslls ydaveelhaa qspqpprrqh
       61 nkvadgenpl gawyvktdis sdvdgplsgr rvavkdniav agvpmmngsr slegfvpsrd
      121 atvvtrllea gatiagkavc edlcfsgash tsatgpvrnp wdptrtsggs ssgsaalvas
      181 aevdlaiggd qggsvripss fcgtvghkpt hglvpytgaf pieltidhlg pitktvadaa
      241 lmlsvlagtd ghdprqpdgl rpqdyvaald sgvaglrvgv veegfgipgl sdpavdevvr
      301 aavarlaeag mevspvsvpw hrhgmhiwnv vategaayqm ldgngyglnw dgsydpelma
      361 hygrnrvera dqlsetvklv alcghysltn yqgrhyamar nlanslrqdy dralrsfdvl
      421 vmptlpytat plvteqdtre tyveraltmi antapldvsg hpaisvpagl seglpvglml
      481 vgkrfddatp lrvahafeql vggfaepprp
>J:
1 mpsqtpgvte lspiadaygl glsegelaef vphvsevlrs wdlvdelyer erpdavtrtw
       61 aepehnpfga wyvtcdites tdgplagrrv avkdntavag vpmmngsaal egfipdtdat
      121 iisrmlaaga tiagkavced lcfsgashts atgpvrnpwd ptrtsggsss gsaalvaagi
      181 vdiatggdqg gsvrlpaaft givghkpthg lvpytgafpi eqtldhlgpm trtvadaall
      241 lgvlagrdgl dprqptrvav pdyvaelkrp vagmrvgvlc egfghpeavp gvddavrrav
      301 dvlraqgmqc envsipwhrh grkiwdviav egattqmvdg naygmnwqga ydpalieffg
      361 srrqadgtll pdtvklvllt grhtirrhhg ahyakarnlv prlraaydda lsrfdvlvmp
      421 ttplvatpip esdaprdeyl aralemmant agldvsghpa csvpaglvdg lptgmmivgr
      481 hfddatvlrv ahayeeatgg flpakvsap
>K:
1 mvrvpdpgrl veiarssfgl rlgeeearsf aglmeasias yrrldqlaep slpvkyprtg
       61 grrpepeenp lnawyyrcsi kgagegplag krvavkdnva vagvpmmngs atlegyvpef
      121 dativtrild aggeisgkav cehlcfsggs htsdtgpvln phdrtrsagg sssgsaalva
      181 agevemaigg dqggsirips cwcgtyglkp tyglvpytgv fpieltldhv gpiaasvsdv
      241 alllsaiage dgldprqrev rvgdyqnale rgvegvrigv vaegfslpsl seedvdetvr
      301 raadtfrelg aevqevsipl hrdgihiwna iaiegatelm vrgngmgtnw eghystslld
      361 aywrgrtala gelsetvklt mltgqymrea yggryyarar nlarrlraay daaleradll
      421 lmptlpmkat kipapdapre evvaralemi pntcpfdvsg hpamnvpcgt seglpvgmml
      481 vgrkwdeetv lraarafekt gayras
>L:
1 mpvvpptlee laelaarhgf rlgeadrksf aglveanlaa heaverlytr sapsaphrdy
       61 ewpednplga wyvrtriapt gdgplsgrev vikdniavag vpmmngsrav egfvprrdat
      121 vvsrvlaagg tivgkavced lcysgssfts asgpvrnpwd parhaggsss gnaallaage
      181 adfaiggdqg gsvrmpaafc gvvghkpthg lvpytgafpi ettidhlgpm trtvrdaall
      241 lsvlagddgf dprqfrtpep pdylaaveqd irgvrvgvlt egfglpmsep gvddavraaa
      301 drlaaagavv sevsvpwhrd gldvwtvigt dgtarqmidg ngygmnvpgr ydpelmvhfa
      361 qgrrvhaddm sdtlktmilt gayaaerydm rhyamarela welragydaa ltevdvlvlp
      421 tvpyvakplp gpdatreerm inalgmvgnt apfdasghpa isvpaapvdg lptglmiagr
      481 rfddamclrv aaayerevgg fpvaar
赞一下 回复此楼
30楼2012-09-05 21:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宝宝曹野

新虫 (初入文坛)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

学习中，多谢楼主~！
赞一下 回复此楼
31楼2012-09-10 09:30:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hotjoker

铜虫 (小有名气)

★★★ 三星级,支持鼓励

受教了。感谢！
回复此楼
27楼2012-08-08 15:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hotjoker

铜虫 (小有名气)
没钱，下载不了。
回复此楼
29楼2012-08-10 17:31:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiliu2011

木虫 (正式写手)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

万分感谢楼主，先自学，有不懂之处还回来请教！
赞一下 回复此楼
33楼2012-09-20 10:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingyu810802

铜虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

谢谢楼主！
刚开始接触，正愁不知道从何下手呢。
赞一下 回复此楼
42楼2013-02-20 22:19:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

某人zy

铜虫 (初入文坛)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

学习一下 ~~
回复此楼
48楼2013-03-07 20:12:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
jinhx872楼
2012-04-06 13:56   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
小神龙1989013楼
2012-04-06 15:22   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
sjshvdc4楼
2012-04-07 12:42   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
guoyuanshi5楼
2012-04-07 16:59   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
austin20086楼
2012-04-08 09:25   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
doublehelix7楼
2012-04-08 18:10   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
angel19128楼
2012-04-11 14:46   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
wylxinyuan--9楼
2012-04-17 13:34   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
321wangke32110楼
2012-04-25 15:18   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
fangni11楼
2012-04-25 15:31   回复  
三星好评  感谢分享
wylxinyuan--12楼
2012-05-04 21:35   回复  
顶一下，感谢分享！
幸运女孩13楼
2012-05-05 15:16   回复  
三星好评  
sherrysure14楼
2012-05-16 11:18   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
original90015楼
2012-06-06 23:26   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
侯云hy16楼
2012-06-07 15:37   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
skjtg17楼
2012-06-09 23:50   回复  
五星好评  感谢分享！
sansanbu00122楼
2012-06-14 16:36   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
ya-qq23楼
2012-06-15 16:24   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
ya-qq24楼
2012-07-18 11:56   回复  
顶一下，感谢分享！
huaxing25楼
2012-07-25 16:30   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
丽丽pb26楼
2012-07-27 17:44   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
蜗牛爬墙32楼
2012-09-18 16:09   回复  
五星好评  顶一下！
hanghongtao34楼
2012-10-08 11:02   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
greenhope337135楼
2012-10-30 19:22   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
wangds36楼
2012-11-01 08:19   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
zero_x4537楼
2012-11-07 14:12   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
敏敏勇勇小虎38楼
2012-11-07 14:36   回复  
五星好评  顶一下
宿辰39楼
2012-11-26 20:15   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
tea_gl987140楼
2012-11-29 23:34   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
rollandyoung41楼
2013-02-18 15:49   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
tantdlly43楼
2013-02-22 10:16   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
tantdlly44楼
2013-02-22 10:16   回复  
tantdlly45楼
2013-02-22 10:17   回复  
安安9046楼
2013-03-01 16:08   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
xcly47楼
2013-03-03 09:04   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
shenhf49楼
2013-03-09 17:02   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
none小妞50楼
2013-03-21 10:51   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
相关版块跳转 我要订阅楼主 shizishanshang 的主题更新
1301/3返回列表123下一页
☆ 无星级 ★ 一星级 ★★★ 三星级 ★★★★★ 五星级
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕调剂 +3 椰椰。 2026-03-29 3/150 2026-03-29 16:53 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-29 5/250 2026-03-29 16:46 by 学员8dgXkO
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +4 IceGuo 2026-03-26 5/250 2026-03-29 01:25 by griffith2014
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +8 曼111 2026-03-24 9/450 2026-03-28 07:58 by YYYYX1234
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 292求调剂 +4 求求了收下我吧� 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:37 by zhshch
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭