24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2854  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

消锦lzhy

新虫 (初入文坛)


[求助] 荧光定量PCR

最近做了一次定量PCR标准曲线,用的染料法,做出来之后的结果很不理想,阴性对照荧光值特别高,求各位大侠帮我看看是污染原因还是引物本身的问题,由于本人是新手,对分子生物学实验相当缺乏经验,现在十分迷茫,不知怎么继续,实验结果如下图:

荧光曲线图



溶解峰



溶解曲线
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

QPCR 问题简答

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

消锦lzhy

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-04 19:14:47:
从图看来可知道你的体系模板加多了。其次是引物有非特异性扩增或者是二聚体。建议对扩增产物跑胶,同时最好先做下普通PCR摸索条件,做荧光PCR摸索条件太浪费钱

非常感谢,其实在这之前用同样的引物优化过PCR反应程序,电泳条带很清晰,而且没有非特异性产物,只是有淡淡的引物二聚体条带,所以才试着做的定量,定量产物跑胶也是同样的情况,不过阴性对照也有条带
6楼2012-04-04 20:36:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 有道理! 2012-04-04 22:25:55
从图看来可知道你的体系模板加多了。其次是引物有非特异性扩增或者是二聚体。建议对扩增产物跑胶,同时最好先做下普通PCR摸索条件,做荧光PCR摸索条件太浪费钱
2楼2012-04-04 19:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

消锦lzhy

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-04 19:14:47:
从图看来可知道你的体系模板加多了。其次是引物有非特异性扩增或者是二聚体。建议对扩增产物跑胶,同时最好先做下普通PCR摸索条件,做荧光PCR摸索条件太浪费钱

非常感谢,其实在这之前用同样的引物优化过PCR反应程序,电泳条带很清晰,而且没有非特异性产物,只是有淡淡的引物二聚体条带,所以才试着做的定量,定量产物跑胶也是同样的情况,不过阴性对照也有条带
3楼2012-04-04 20:36:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

消锦lzhy

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-04 19:14:47:
从图看来可知道你的体系模板加多了。其次是引物有非特异性扩增或者是二聚体。建议对扩增产物跑胶,同时最好先做下普通PCR摸索条件,做荧光PCR摸索条件太浪费钱

非常感谢,其实在这之前用同样的引物优化过PCR反应程序,电泳条带很清晰,而且没有非特异性产物,只是有淡淡的引物二聚体条带,所以才试着做的定量,定量产物跑胶也是同样的情况,不过阴性对照也有条带
4楼2012-04-04 20:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 14:13 by luhong1990
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +6 Ytyt11 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:52 by AA小小木虫
[考研] 调剂 +4 电气300求调剂不 2026-04-08 7/350 2026-04-11 10:44 by 紫曦紫棋
[考研] 材料与化工调剂 10+11 下一站上岸@ 2026-04-10 36/1800 2026-04-11 10:26 by 89436494
[考研] 284求调剂 +12 archer.. 2026-04-10 13/650 2026-04-11 08:44 by zhq0425
[考研] 284求调剂 +19 梵@@ 2026-04-06 21/1050 2026-04-10 21:12 by zhouxiaoyu
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 本科西工大 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:00 by 来看流星雨10
[考研] 一志愿京区985,085401,与本科专业一致,电子信息工程, +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 青岛科技大学材料学院,环境学院调剂补录4月10日以前都可以 +3 1青科大。 2026-04-09 5/250 2026-04-10 09:58 by 翩翩一书生
[考研] 求调剂希望还是希望在山河四省附近 +3 快乐的小白鸽 2026-04-05 3/150 2026-04-09 17:36 by wp06
[考研] 085600材料与化工,求调剂 +11 won_qii 2026-04-07 11/550 2026-04-09 17:03 by luoyongfeng
[考研] 一志愿郑州大学085600求调剂 +21 吃的不少 2026-04-05 24/1200 2026-04-08 16:47 by sunhuadong
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +9 墨彧 yuyu 2026-04-06 9/450 2026-04-08 11:24 by 想读书的菌菌
[考研] 326分,一志愿沪9,求生物学调剂 +4 刘墨墨 2026-04-05 4/200 2026-04-08 06:22 by lijunpoly
[考研] 287分求调剂 有专利国奖一志愿哈工大085406 +6 白易辰 2026-04-06 7/350 2026-04-06 22:46 by 875465
信息提示
请填处理意见