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生化道长

至尊木虫 (知名作家)

[求助] Taq酶PCR的问题

请问各位大侠,用Taq酶对1.3KB的基因进行PCR,出错的可能性有多大?
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锦青

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

la taq酶与普通酶有什么不同
happy everyday
6楼2013-03-28 15:34:11
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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生化道长: 金币+1, ★★★很有帮助, Thanks 2012-04-01 10:37:08
这个看序列,也有运气。不过正常情况下做克隆用taq酶是可以的
2楼2012-04-01 10:29:13
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highjmq

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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生化道长: 金币+3, ★★★很有帮助, Thanks 2012-04-01 10:37:59
生化道长: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-04-01 10:51:21
西瓜: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-01 17:44:41
1.3KB的话如果用taq酶不会有太大问题。lataq比较适合长片段,extaq效率比较高,puf可以有很高的保真性,一般来说如果做克隆,不是太难批的片段(引物结构较少,长度适中,1-2.5kb之间),taq没什么问题的,注意割胶时候紫外不要照太久,这步突变几率较高。还有不同实验室的时候有时候会发生自发的品系基因突变,这个可以用多次测序来判断。
3楼2012-04-01 10:34:34
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-01 18:01:54
生化道长: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-04-02 12:10:20
rTaq出错率高一些,exTaq要好一些,平均1000个碱基里有一个吧,1.3kb用exTaq还是可以的
4楼2012-04-01 12:58:46
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