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danyzj01

银虫 (正式写手)

[交流] PCR提取试剂盒不见了,手动配置DNA提取试剂一般都需要准备哪些试剂? 已有8人参与

请问试剂的名称及其浓度是多少?
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nnxqwei

至尊木虫 (职业作家)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-02 23:51:28:
那应该如何提取细菌的DNA作为模板呢,需要自配什么溶剂

要是用CTAB法的话,看《分子克隆实验指南》会有详细的配方和方法呀
12楼2012-04-03 00:02:49
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
嗯................
是指提基因组DNA吗?为何说是PCR提取试剂盒?是指胶回收盒子?
Let God do with it as He wills
2楼2012-03-30 20:43:22
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danyzj01

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-30 20:43:22:
嗯................
是指提基因组DNA吗?为何说是PCR提取试剂盒?是指胶回收盒子?

就是DNA模版提取
3楼2012-03-30 22:59:53
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 很详细了 2012-03-31 09:37:57
嗯..................
那么是说CTAB法提取DNA吧
那么我贴我自己的方案了:
Reagents:
CTAB Extraction Buffer: 50 mL
2 %(V/V) CTAB--------1.000 g
100mM Tris-Hydrochloric acid(pH 8.0)--------0.605 g
1.4M Sodium chloride--------4.091 g
20mM EDTA•Na2--------0.372 g
Sterilize reagent and store at -4 °C
----------------------------------------------------------------------------------------------------
Wash Buffer: 20 mL
76 % Ethanol--------15.2 mL Anhydrous ethanol
10mM Ammonium acetate--------0.015 g
Distill water--------up to 20 mL

自个有把Protocol翻译成英文的习惯,所以你凑合的看吧,这是用于我们提植物基因组DNA用的,不知是否能用于你的实验
希望有所帮助若有错的话请高手指正
Let God do with it as He wills
4楼2012-03-30 23:19:17
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