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thestormcong银虫 (小有名气)
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red基因敲除转化子
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| 小弟最近做了一轮电转化,转化子数量也还可以,20个左右,可是暂时挑取的转化子都是假阳性,pcr条带的大小跟野生株的一样,目的基因没有被置换。怀疑是不是转化的时候模板没有去除干净的原因。我用dpnI消化,再切胶回收。50ulpcr产物加1ul的酶和3ul的T buffer。请教各位有经验的虫子给点建议。还有在这些转化子里面,如果我接着挑,有没有可能挑到我想要的呢? |
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