| 查看: 541 | 回复: 1 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
[求助]
如何做三段连接
|
|||
| 手头上有两个PCR片段和一个载体，酶切位点都合适，想做三段酶切连接。求有经验的人给予些实验指导和实验注意事项。不甚感激！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有58人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教一下连接与转化问题！
已经有11人回复
- 将两段基因连进载体连不进去
已经有4人回复
- 把两段基因片段连接起来应该用什么技术？
已经有6人回复
- CV图和EIS图，求解
已经有12人回复
- 如何将下面的序列连接在一起？
已经有8人回复
- 电脑在正常连接无线网络一段时间时会突然中断
已经有9人回复
- 【求助/交流】做完连接转化居然掉下一段基因...？求答案
已经有17人回复
- 【求助】做高压釜实验，需要4－8MPa的高压。如何连接钢瓶？
已经有22人回复
- 【求助/交流】以连接产物做模板扩增此连接产物，有问题请教各位达人~麻烦您帮忙分析下
已经有9人回复
srlee
铁杆木虫 (小有名气)
- MolEPI: 7
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 4485.7
- 散金: 17
- 红花: 3
- 帖子: 218
- 在线: 508.4小时
- 虫号: 802845
- 注册: 2009-07-03
- 专业: 生物防治
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！果断EPI！ 2012-03-11 16:36:02
liuwei78(金币+3): 2012-03-12 19:58:09
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！果断EPI！ 2012-03-11 16:36:02
liuwei78(金币+3): 2012-03-12 19:58:09
|
又是连接问题，不过你的问题好像没有说清楚，别人给不了你具体的建议呀！ 1）“酶切位点都合适”是指你设计引物时添加的合适的酶切位点吗？ 2）你连接的载体多大？你要连接的两个片段分别又是多大？ 具体实验操作： 1）你可以先一个载体和一个片段连接验证后，再连第二个片段，这个方法就是一般的连接操作了。 2）你也可以将两个片段和载体一起加入到连接体系里连接，这个方法存在连接效率不高的问题，主要看你的片段大小和设计的酶切位点啦！ 3）你也可以用overlap PCR先把两个片段连起来，然后再和载体连接，具体操作看你后续试验要做什么了！ 祝实验顺利！ |
2楼2012-03-11 15:17:35