应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 小鼠胚胎培养液KSOM的问题
151/2返回列表12下一页
查看: 4281  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

闺闺love

铜虫 (初入文坛)

[求助] 小鼠胚胎培养液KSOM的问题

KSOM好像只有Millipore有是吗？不知道Millipore怎么回事，现在订药品总是很不给力的老是订不上。我想自己配KSOM呢，但是照着《小鼠胚胎操作》那本书上的配方配出来的液体效果不理想。不知各位有KSOM的比较成熟的配方吗？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-28 13:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

stfoxst

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
闺闺love: 金币+2, ★有帮助 2012-03-19 19:01:31
书上的配方没问题，我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化，BSA可以加到6或8，效果非常好。
不知道你用的是什么试剂，必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条件也是必须控制的。
不知道你说的效果不理想是指什么。阻滞、发育不好、胚胎质量差？
赞一下(1人) 回复此楼
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
2楼2012-03-18 23:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-18 23:16:25:
书上的配方没问题，我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化，BSA可以加到6或8，效果非常好。
不知道你用的是什么试剂，必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条 ...

我完全按照书上的配过一次，细胞发育停滞且皱缩，皱缩有可能是渗透压的问题，配完液体确实没测渗透压。试剂都是sigma的，水应该也没问题呢。不过，现在已经在millipore订了ksom了，只是还没到货，在等呢，很慢！
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-19 19:08:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfoxst

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
telomerase: 金币+3, 谢谢你的热心应助，分享经验！！！ 2012-03-20 09:27:33
引用回帖:
3楼: Originally posted by 闺闺love at 2012-03-19 19:08:25:
我完全按照书上的配过一次，细胞发育停滞且皱缩，皱缩有可能是渗透压的问题，配完液体确实没测渗透压。试剂都是sigma的，水应该也没问题呢。不过，现在已经在millipore订了ksom了，只是还没到货，在等呢，很慢！

如果有阻滞肯定是某个成分有问题。
我们也不测渗透压，没必要。
PH第一次调完后，要放到培养箱2-4h，拿出来再调到7.5。
这样找原因太困难了。其实最好的办法是你找一个实验室，去跟着做一次，养到囊胚。以后就能做好了。
我们实验室的师弟师妹开始也会遇到这种问题，跟着做一两次就好了，也说不上到底错误出在哪里。不过倒是有人配的液体一加酚红就是紫的，那肯定是某个成分加错了，应该是黄色。
要是特别有钱买也无所谓啦。除了KSOM，G1/G2更好用。有钱就买这个吧。
赞一下 回复此楼
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
4楼2012-03-20 00:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-18 23:16:25:
书上的配方没问题，我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化，BSA可以加到6或8，效果非常好。
不知道你用的是什么试剂，必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条 ...

请问你们体外培养囊赔率达到100%，是从几细胞期开始培养的？培养基是自己配制还是购买？
赞一下 回复此楼
彩云之南的愿望还能实现吗
5楼2012-04-20 11:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfoxst

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by timmychina at 2012-04-20 11:37:04:
请问你们体外培养囊赔率达到100%，是从几细胞期开始培养的？培养基是自己配制还是购买？

是从受精卵开始的，也就是1细胞期。
培养液是我们自己配制的KSOM。
现在的小鼠胚胎体外培养体系已经很成熟了，各方面条件控制好的话，达到100%的囊胚率很正常，文献中也有相关的报道。
赞一下 回复此楼
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
6楼2012-04-23 17:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-20 00:04:38:
如果有阻滞肯定是某个成分有问题。
我们也不测渗透压，没必要。
PH第一次调完后，要放到培养箱2-4h，拿出来再调到7.5。
这样找原因太困难了。其实最好的办法是你找一个实验室，去跟着做一次，养到囊胚。以后就 ...

G1/G2也是培养液吗？请问是哪个公司的？
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-05 15:43:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by stfoxst at 2012-04-23 17:00:33:
是从受精卵开始的，也就是1细胞期。
培养液是我们自己配制的KSOM。
现在的小鼠胚胎体外培养体系已经很成熟了，各方面条件控制好的话，达到100%的囊胚率很正常，文献中也有相关的报道。

现在ksom还是不好定，暂时用M16代替着
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-05 15:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfoxst

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 闺闺love at 2012-05-05 15:43:10:
G1/G2也是培养液吗？请问是哪个公司的？

vitrolife的。做辅助生殖的都用，应该好定到。
M16用于培养效果一般，实在不行可以试试CZB，2cell前用低糖的CZB，过了2cell换成高糖的，这个培养基效果也很好。
赞一下 回复此楼
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
9楼2012-05-08 11:13:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by stfoxst at 2012-05-08 11:13:14:
vitrolife的。做辅助生殖的都用，应该好定到。
M16用于培养效果一般，实在不行可以试试CZB，2cell前用低糖的CZB，过了2cell换成高糖的，这个培养基效果也很好。

我想订millipore的ksom是因为他有种产品不含BSA，不知M16、czb都含BSA呢，现在还是订不到ksom，很着急呢。我准备自己按书上的配方先配了，看看效果。
赞一下 回复此楼
10楼2012-05-09 16:59:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 闺闺love 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +12 硕星赴 2026-04-09 13/650 2026-04-09 21:26 by 学员jIFgUM
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所，有机化学356分找调剂 +11 Nadiums 2026-04-09 11/550 2026-04-09 18:04 by lijunpoly
[考研] 332，085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 0702物理学学硕299求调剂 +5 祁柒连 2026-04-06 5/250 2026-04-09 09:27 by wj165256
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +3 弱水听文 2026-04-09 3/150 2026-04-09 09:06 by susuqq
[考研] 求调剂 +7 chenxrlkx 2026-04-05 9/450 2026-04-09 09:04 by wj165256
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +12 王王白石 2026-04-06 13/650 2026-04-08 16:05 by luoyongfeng
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +11 wwwwabcde 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:16 by JourneyLucky
[考研] 材料调剂 +13 汉123456 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:53 by 来看流星雨10
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
[考研] 277求调剂 数一104分 +9 瓶子PZ 2026-04-05 14/700 2026-04-07 17:52 by 蓝云思雨
[考研] 26自然地理学303分求调剂 +4 一战成硕啊啊啊� 2026-04-06 9/450 2026-04-06 20:35 by lin-da
[考研] 346分的生物与医药08600求调剂 +6 常雨阳上岸 2026-04-05 7/350 2026-04-06 12:36 by lys0704
[考研] 生物与医药086000调剂一志愿西北农林320分 +3 美美女士 2026-04-03 3/150 2026-04-05 21:55 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +6 Yy7400 2026-04-03 6/300 2026-04-04 09:53 by zhangdingwa
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭