应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 小鼠胚胎培养液KSOM的问题
151/2返回列表12下一页
查看: 4242  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

闺闺love

铜虫 (初入文坛)

[求助] 小鼠胚胎培养液KSOM的问题

KSOM好像只有Millipore有是吗？不知道Millipore怎么回事，现在订药品总是很不给力的老是订不上。我想自己配KSOM呢，但是照着《小鼠胚胎操作》那本书上的配方配出来的液体效果不理想。不知各位有KSOM的比较成熟的配方吗？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-28 13:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

stfoxst

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
闺闺love: 金币+2, ★有帮助 2012-03-19 19:01:31
书上的配方没问题，我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化，BSA可以加到6或8，效果非常好。
不知道你用的是什么试剂，必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条件也是必须控制的。
不知道你说的效果不理想是指什么。阻滞、发育不好、胚胎质量差？
赞一下(1人) 回复此楼
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
2楼2012-03-18 23:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-18 23:16:25:
书上的配方没问题，我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化，BSA可以加到6或8，效果非常好。
不知道你用的是什么试剂，必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条 ...

我完全按照书上的配过一次，细胞发育停滞且皱缩，皱缩有可能是渗透压的问题，配完液体确实没测渗透压。试剂都是sigma的，水应该也没问题呢。不过，现在已经在millipore订了ksom了，只是还没到货，在等呢，很慢！
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-19 19:08:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfoxst

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
telomerase: 金币+3, 谢谢你的热心应助，分享经验！！！ 2012-03-20 09:27:33
引用回帖:
3楼: Originally posted by 闺闺love at 2012-03-19 19:08:25:
我完全按照书上的配过一次，细胞发育停滞且皱缩，皱缩有可能是渗透压的问题，配完液体确实没测渗透压。试剂都是sigma的，水应该也没问题呢。不过，现在已经在millipore订了ksom了，只是还没到货，在等呢，很慢！

如果有阻滞肯定是某个成分有问题。
我们也不测渗透压，没必要。
PH第一次调完后，要放到培养箱2-4h，拿出来再调到7.5。
这样找原因太困难了。其实最好的办法是你找一个实验室，去跟着做一次，养到囊胚。以后就能做好了。
我们实验室的师弟师妹开始也会遇到这种问题，跟着做一两次就好了，也说不上到底错误出在哪里。不过倒是有人配的液体一加酚红就是紫的，那肯定是某个成分加错了，应该是黄色。
要是特别有钱买也无所谓啦。除了KSOM，G1/G2更好用。有钱就买这个吧。
赞一下 回复此楼
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
4楼2012-03-20 00:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-18 23:16:25:
书上的配方没问题，我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化，BSA可以加到6或8，效果非常好。
不知道你用的是什么试剂，必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条 ...

请问你们体外培养囊赔率达到100%，是从几细胞期开始培养的？培养基是自己配制还是购买？
赞一下 回复此楼
彩云之南的愿望还能实现吗
5楼2012-04-20 11:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfoxst

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by timmychina at 2012-04-20 11:37:04:
请问你们体外培养囊赔率达到100%，是从几细胞期开始培养的？培养基是自己配制还是购买？

是从受精卵开始的，也就是1细胞期。
培养液是我们自己配制的KSOM。
现在的小鼠胚胎体外培养体系已经很成熟了，各方面条件控制好的话，达到100%的囊胚率很正常，文献中也有相关的报道。
赞一下 回复此楼
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
6楼2012-04-23 17:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-20 00:04:38:
如果有阻滞肯定是某个成分有问题。
我们也不测渗透压，没必要。
PH第一次调完后，要放到培养箱2-4h，拿出来再调到7.5。
这样找原因太困难了。其实最好的办法是你找一个实验室，去跟着做一次，养到囊胚。以后就 ...

G1/G2也是培养液吗？请问是哪个公司的？
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-05 15:43:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by stfoxst at 2012-04-23 17:00:33:
是从受精卵开始的，也就是1细胞期。
培养液是我们自己配制的KSOM。
现在的小鼠胚胎体外培养体系已经很成熟了，各方面条件控制好的话，达到100%的囊胚率很正常，文献中也有相关的报道。

现在ksom还是不好定，暂时用M16代替着
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-05 15:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfoxst

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 闺闺love at 2012-05-05 15:43:10:
G1/G2也是培养液吗？请问是哪个公司的？

vitrolife的。做辅助生殖的都用，应该好定到。
M16用于培养效果一般，实在不行可以试试CZB，2cell前用低糖的CZB，过了2cell换成高糖的，这个培养基效果也很好。
赞一下 回复此楼
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
9楼2012-05-08 11:13:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by stfoxst at 2012-05-08 11:13:14:
vitrolife的。做辅助生殖的都用，应该好定到。
M16用于培养效果一般，实在不行可以试试CZB，2cell前用低糖的CZB，过了2cell换成高糖的，这个培养基效果也很好。

我想订millipore的ksom是因为他有种产品不含BSA，不知M16、czb都含BSA呢，现在还是订不到ksom，很着急呢。我准备自己按书上的配方先配了，看看效果。
赞一下 回复此楼
10楼2012-05-09 16:59:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 闺闺love 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +18 rare12345 2026-03-18 18/900 2026-03-19 22:36 by 学员8dgXkO
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +9 一鸭鸭哟 2026-03-14 11/550 2026-03-19 17:22 by ！本暗一次！
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 求调剂 +3 Mqqqqqq 2026-03-19 3/150 2026-03-19 14:11 by peike
[考研] 332求调剂 +3 ydfyh 2026-03-17 3/150 2026-03-19 10:14 by 功夫疯狂
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +7 步川酷紫123 2026-03-13 7/350 2026-03-18 17:12 by 尽舜尧1
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 生物学071000 329分求调剂 +3 我爱生物生物爱� 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:12 by macy2011
[基金申请] 被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗？ 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭