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willzhuu

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 闺闺love at 2012-05-09 16:59:30:
我想订millipore的ksom是因为他有种产品不含BSA,不知M16、czb都含BSA呢,现在还是订不到ksom,很着急呢。我准备自己按书上的配方先配了,看看效果。

BSA不稳定,好像一般都是现加的
不求一鸣惊人,但求抛砖引玉。
11楼2012-05-10 17:30:23
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stfoxst

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 闺闺love at 2012-05-09 16:59:30:
我想订millipore的ksom是因为他有种产品不含BSA,不知M16、czb都含BSA呢,现在还是订不到ksom,很着急呢。我准备自己按书上的配方先配了,看看效果。

你们的实验要求无蛋白条件吗?那可挺不好弄的。
干脆不加试试,也能养出来,只是发育率低些。
或者试试用PVP什么的替代BSA,不过没这样做过,效果不好说。
另外,弄一小块输卵管共培养也可以。虽然分泌一些因子,不过可以忽略不计,毕竟胚胎本身也分泌蛋白因子。
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
12楼2012-05-11 12:27:28
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panghuajin

新虫 (初入文坛)


youlinglyw: 编辑内容 2014-03-16 11:32
已删除

[ Last edited by youlinglyw on 2014-3-16 at 11:32 ]
13楼2013-06-25 16:34:46
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linera123

新虫 (初入文坛)

不知道楼主现在培养体系怎么样,我现在也是出现二细胞阻滞呢
14楼2015-07-18 16:34:44
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wwj+1992

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-18 23:16:25
书上的配方没问题,我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化,BSA可以加到6或8,效果非常好。
不知道你用的是什么试剂,必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条件 ...

前辈好:
实验小白来讨经验了,我也是从一细胞开始培养的(HCG之后19个小时左右),用的是Millipore的KSOM,但是;我培养的囊胚率跟您的差老远了,我培养的囊胚率还不到70%,请问您一直都是用的自己配的KSOM吗?还有不知您现在是否还在当时的实验室,您方不方便说一下您以前的实验室名字及其所在单位,如果可能,我想去您那里学习,望回复,非常感谢!
15楼2017-02-27 15:04:31
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