24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 4284  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)

[求助] 小鼠胚胎培养液KSOM的问题

KSOM好像只有Millipore有是吗?不知道Millipore怎么回事,现在订药品总是很不给力的老是订不上。我想自己配KSOM呢,但是照着《小鼠胚胎操作》那本书上的配方配出来的液体效果不理想。不知各位有KSOM的比较成熟的配方吗?谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by stfoxst at 2012-04-23 17:00:33:
是从受精卵开始的,也就是1细胞期。
培养液是我们自己配制的KSOM。
现在的小鼠胚胎体外培养体系已经很成熟了,各方面条件控制好的话,达到100%的囊胚率很正常,文献中也有相关的报道。

现在ksom还是不好定,暂时用M16代替着
8楼2012-05-05 15:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

stfoxst

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
闺闺love: 金币+2, 有帮助 2012-03-19 19:01:31
书上的配方没问题,我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化,BSA可以加到6或8,效果非常好。
不知道你用的是什么试剂,必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条件也是必须控制的。
不知道你说的效果不理想是指什么。阻滞、发育不好、胚胎质量差?
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
2楼2012-03-18 23:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闺闺love

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-18 23:16:25:
书上的配方没问题,我们培养受精卵囊胚率可以达到100%。
如果要优化,BSA可以加到6或8,效果非常好。
不知道你用的是什么试剂,必须用Sigma和Gibco。水质也非常重要。胚胎对这个还是很敏感的。
小鼠本身饲养条 ...

我完全按照书上的配过一次,细胞发育停滞且皱缩,皱缩有可能是渗透压的问题,配完液体确实没测渗透压。试剂都是sigma的,水应该也没问题呢。不过,现在已经在millipore订了ksom了,只是还没到货,在等呢,很慢!
3楼2012-03-19 19:08:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stfoxst

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
telomerase: 金币+3, 谢谢你的热心应助,分享经验!!! 2012-03-20 09:27:33
引用回帖:
3楼: Originally posted by 闺闺love at 2012-03-19 19:08:25:
我完全按照书上的配过一次,细胞发育停滞且皱缩,皱缩有可能是渗透压的问题,配完液体确实没测渗透压。试剂都是sigma的,水应该也没问题呢。不过,现在已经在millipore订了ksom了,只是还没到货,在等呢,很慢!

如果有阻滞肯定是某个成分有问题。
我们也不测渗透压,没必要。
PH第一次调完后,要放到培养箱2-4h,拿出来再调到7.5。
这样找原因太困难了。其实最好的办法是你找一个实验室,去跟着做一次,养到囊胚。以后就能做好了。
我们实验室的师弟师妹开始也会遇到这种问题,跟着做一两次就好了,也说不上到底错误出在哪里。不过倒是有人配的液体一加酚红就是紫的,那肯定是某个成分加错了,应该是黄色。
要是特别有钱买也无所谓啦。除了KSOM,G1/G2更好用。有钱就买这个吧。
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
4楼2012-03-20 00:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 301求调剂 +3 XYPLR 2026-04-05 5/250 2026-04-09 20:55 by lbsjt
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[考研] 085402通信工程调剂,有4项学科竞赛国奖(电赛国二),硕士研究生调剂自荐信。 +3 m永o不v言o弃m 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:17 by 紫曦紫棋
[考研] 考研调剂 +13 冰冰,,, 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分 +15 多多爱吃汉堡 2026-04-04 16/800 2026-04-08 11:39 by i_cooler
[考研] 材料工程专业日语生求调剂 +9 111623 2026-04-07 9/450 2026-04-07 23:31 by 一只好果子?
[考研] 277、学硕,求调剂 数一104, +11 瓶子PZ 2026-04-07 12/600 2026-04-07 23:30 by 一只好果子?
[考研] 071000生物学,一志愿深圳大学296分,求调剂 +12 TIckLw 2026-04-06 13/650 2026-04-07 20:34 by lijunpoly
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 081700学硕,323分,一志愿中国海洋大学求调剂学校 +19 披星河 2026-04-04 19/950 2026-04-07 15:00 by 上岸快快
[考研] 372分材料与化工(085600)英二数二求调剂 +4 蓝笺片 2026-04-06 4/200 2026-04-07 12:30 by dongzh2009
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
[考研] 0817化学工程与技术求调剂,一志愿中海洋319 +14 lv945 2026-04-04 14/700 2026-04-06 10:20 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +12 lyz0427 2026-04-03 12/600 2026-04-06 06:37 by houyaoxu
[考研] 327求调剂 +4 拾光任染 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:16 by 南航~万老师
[考研] 272求调剂 +4 电气李 2026-04-05 4/200 2026-04-05 10:41 by lbsjt
[考研] 334求调剂 +8 曾仰之 2026-04-03 8/400 2026-04-04 11:16 by w_xuqing
[考研] 求调剂 +3 心想事成可 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:22 by wangjy2002
信息提示
请填处理意见