| 查看: 3798 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
T7载体的IPTG诱导
|
||
|
大家好！ 我在做基因克隆，载体用的是T7载体，由于克隆的基因较多，所以蛋白诱导方面比较麻烦。可能每个基因所表达蛋白的条件都不一样，我现在想粗略的看一下诱导时间和温度以及诱导剂添加量对诱导的影响，我用的诱导剂是IPTG。我想请教一下一般IPTG在温度，时间，用量上有没有通用的范围或规则？我有看过文献报道，说T7载体用IPTG诱导会容易形成包涵体。 而且我现在是粗略的诱导检测有无蛋白表达，所以并没有在OD=0.6-0.8时诱导，而且诱导一般是过夜诱的，诱导温度20℃，不知会否对这种载体的诱导有影响？ 我的宿主细胞是BL21. 请同行高手给与指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有271人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- [size=5]外源基因原核表达遭遇种种瓶颈，求各位高手近来解答[/size]
已经有13人回复
- 【求助/交流】十万火急，IPTG诱导是怎么回事，给我说个大概
已经有9人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌BL21的问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导问题咨询
已经有13人回复
- 【求助/交流】原核表达载体pGEX-4T-1对应的表达菌株
已经有6人回复
9楼2012-02-24 22:01:48
2楼2012-02-23 20:33:17
3楼2012-02-23 21:16:44
lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
- MolEPI: 58
- 应助: 388 (硕士)
- 贵宾: 0.238
- 金币: 17138.7
- 红花: 43
- 帖子: 2251
- 在线: 712.4小时
- 虫号: 111074
- 注册: 2005-11-20
- 专业: 生物化学
4楼2012-02-23 21:30:27
20