24小时热门版块排行榜    

查看: 4473  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mumiancc

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于细胞实验是否必须要除盐和蛋白质透析的问题

请教下各位,我现在用0.01M PH7.2 Tris-Hcl缓冲液粗提的蛋白想要做细胞活性实验,想问下是否要将Tris-Hcl缓冲盐除去呢?如果除去我用透析的方法可行吗?如果透析的话,透析液直接用去离子水可以吗?透析后冻干,再用细胞培养基溶解,再做细胞实验,这样做合理吗?刚刚开始做实验,很晕,先谢谢各位了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xbingfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
silicare(金币+2): 谢谢参与 2012-02-20 12:40:12
就Tris本来来说它对细胞的毒性不大, 除非浓度很高。。。
其实你应该这样想,一般来说你自己制备的蛋白质溶液一般都比较浓,加到细胞里面之前肯定要稀释的,稀释后Tris的浓度就没那么高了。。
5楼2012-02-19 18:44:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
silicare(金币+1): 谢谢参与 2012-02-20 12:39:48
这个不懂,个人理解如下仅供参考:Tris-Hcl在蛋白纯化时提供的是相对稳定的pH,PBS模拟的是生理状态下的盐浓度和渗透压。如果不透析,细胞实验结果与预期实验相符,能说的过去;如果差别较大,troubleshooting时,是因为Tris-Hcl呢?还是因为蛋白本身呢?不易判断。细胞在传代时也常用PBS洗涤,综上,个人意见是PBS透析。
2楼2012-02-19 13:39:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mumiancc

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 256k at 2012-02-19 13:39:22:
这个不懂,个人理解如下仅供参考:Tris-Hcl在蛋白纯化时提供的是相对稳定的pH,PBS模拟的是生理状态下的盐浓度和渗透压。如果不透析,细胞实验结果与预期实验相符,能说的过去;如果差别较大,troubleshooting时, ...

谢谢了,还是想请教下,如果不做透析,直接带着tris-hcl冻干,冻干后再用培养基溶解,这样的话,tris-hcl会对细胞产生影响吗?就tris本身来说,它对细胞有影响吗?我要用小鼠成纤维细胞
3楼2012-02-19 15:27:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingzhang08

新虫 (初入文坛)

同觉得tris没有太大的影响
6楼2012-02-19 23:07:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 v7Aev8ORQjin 2026-08-22 3/150 2026-08-23 20:58 by 0p9y1isJp2jM
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 19:55 by lXgU0RvNTDC9
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:43 by lXgU0RvNTDC9
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 7/350 2026-08-23 19:10 by lXgU0RvNTDC9
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 炎黄贵胄 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见